人血清生长**放免测定盒操作说明书
HGH（FK-037） RIA KIT
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人血清生长**（HGH）放免试剂盒，HGH RIA KIT
临床意义：
生长**（HGH）是垂体前叶分泌的糖蛋白**，分子量为21500，含有191个氨基酸。生长**是一种调节物质代谢的重要**，它主要作用是促进肝脏释放葡萄糖，促进脂肪氧化分解，促进蛋白质合成，刺激颅骨、下颌骨增大及软骨肥大、骨骺软骨增生，促进某些肿瘤生长及刺激泌乳。
测定原理：
本药盒利用放射**分析方法进行测定。在均相竞争抑制反应中采用饱和平衡法，对病人血清样品中GH进行直接测定。测定中，标准品、样品等中的GH与125I-GH竞争限量抗血清的结合位。当被测物中GH的浓度高时，剩余的抗血清结合位就少，从而与抗血清结合125I-GH就少，反之结合就多。利用**分离剂分离出抗原－抗血清复合物，并测定复合物中的放射性计数。125I-GH的结合量与样品中GH浓度呈函数关系，通过数据处理可求出样品中GH的含量。
标本采集：
取晨空腹的静脉血，分离血清，放2－8℃可保存一周。如不立即测定，血清样品必须在-20℃保存，且不超过30天，应避免反复冻融。严重溶血的样品影响测定结果。
药合组成及配制：
1、 125I-HGH 1 瓶。使用时用 ml缓冲液溶解（如不填写，100管用10ml，50管用5ml
缓冲液溶解）
2、 HGH抗体 1 瓶。
3、 HGH标准品 6 瓶，使用时每瓶用1.0ml缓冲液溶解。其浓度分别为0、1、3、9、20、50ng/ml。
4、 分离剂（**抗体） 1瓶。
5、缓冲液1瓶。
以上各组份试剂应在使用前配制且摇匀使用。
操作方法：
试管编号，按下表程序操作。
HGH RIA 加样步骤 （ 单位: ul）
管 别 | 缓冲液 | 标准品 | 样品 | 125I-HGH | 抗血清 | 混匀，37℃放置过夜，任取三管测总T（CPM）。 | 分离剂 |
NSB管 | 100 | 100（S0） | －－ | 100 | －－ | 1000 |
S0管 | －－ | 100 | －－ | 100 | 100 | 1000 |
S1-S末管 | －－ | 100 | －－ | 100 | 100 | 1000 |
样品管 | －－ | －－ | 100 | 100 | 100 | 1000 |
混匀，室温放置20分钟，离心（3500转/分）15分钟，吸弃上清液，测定各管沉淀的放射性计数（CPM）。
数据处理：
1、 计算机处理：建议函数模型采用三次多项式或log～logit法。
2、 计算、绘图法：
计算各管的百分率：以S0（cpm数）为B0，各标准管Si（cpm数）为Bi，求各管的百分结合率。
Bi Bi管（cpm）— NSB管（cpm）
— %= —————————————— ×100
B0 B0管（cpm）— NSB管（cpm）
（1）线性回归：用logX～logitY回归，求出r、a、b值，样品含量可由下式计算得出。
- a +logit Y
Log X= ————
b
（2）绘图法：用各标准点计算的结果，在log～logit坐标纸上绘制标准曲线图，未知样品浓度可根据Bi/B0的百分结合率从标准曲线图上查出。
正常叁考值：
各实验室应建立自己的正常值，下列正常参考值仅供参考：
HGH＜5ng/ml
技术特性：
1、曲线范围：（1～50）ng/ml
2、灵敏度： < 0.5ng/ml
3、特异性：HGH抗血清与HRL的交叉反应<9×10-3
4、精密度：批内CVw<9%，批间CVb<13%
保存及有效期：
药盒于（2～8）℃避光保存，切勿冻存。自检定合格之日起有效期为45天。
药盒参考数据：
指标 | B/T（%） | Bi/B0（%） |
项目 | NSB | S0 | S1 | S末 |
参数 | | | | |
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