食用白醋中HAc浓度的测定

　　一、实验原理

　　醋酸为有机弱酸(Ka=1.8×10—5)，与NaOH反应式为

　　HAc + NaOH-----NaAc + H20

　　反应产物为弱酸强碱盐，滴定突跃在碱性范围内，可选用酚酞等碱性范围变色的指示剂。

　　食用白醋中醋酸含量大约在30～50 mg·mL-1。

　　二、主要试剂和仪器

　　1. NaOH溶液 0.1mol·L—1

　　用烧杯在粗天平上称取4g固体NaOH，加人新鲜的或煮沸除去CO2的蒸馏水，溶解完全后，转入带橡皮塞的试剂瓶中，加水稀释至1 L，充分摇匀。

　　2.酚酞指示剂 2g·L—1 乙醇溶液。

　　3.邻苯二甲酸氢钾(KHC8H4O4)基准物质 在100～125℃干燥1 h后，置于干燥器中备用。

　　三、实验步骤

　　1.0.1 m01·L—1 NaOH标准溶液浓度的标定

　　在称量瓶中以差减法称量KHC8H4O4 3份，每份0.4～0. 6g，分别倒入250 mL锥形瓶中，加入40～50mL蒸馏水，待试剂完全溶解后，加入2～3滴酚酞指示剂，用待标定的NaOH溶液滴定至呈微红色并保持半分钟即为终点，计算NaOH溶液的浓度和各次标定结果的相对偏差。

　　2.食用白醋含量的测定

　　准确移取食用白醋25.00mL置于250 mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度、摇匀。用50 mL移液管分取3份上述溶液，分别置于250mL锥形瓶中，加入酚酞指示剂2～3滴，用NaOH标准溶液滴定至微红色在30s内不褪即为终点。计算每100mL食用白醋中含醋酸的质量。

　　四、数据记录与处理

食用白醋中醋酸浓度的测定

　　一、实验原理

　　醋酸为有机弱酸(Ka = 1.8×10-5 )，用NaOH标准溶液滴定，在化学计量点时溶液呈弱碱性，滴定突跃在碱性范围内，选用酚酞作指示剂，以醋酸的质量浓度(g·mL-1 )表示。

　　二、主要仪器和试剂：

　　1.碱式滴定管50mL

　　2.移液管25mL

　　3.容量瓶250mL;

　　4.白醋(市售)

　　5.氢氧化钠0.1mol·L-1

　　10.酚酞 2g·L-1乙醇溶液、

　　11.邻苯二甲酸氢钾基准物质 在100 ～ 125℃干燥1h后，置于干燥器内备用。

　　三、实验步骤

　　1.0.1mol·L-1 NaOH标准溶液的配制和标定

　　台秤上称取4g固体NaOH于烧杯中，加入除去CO2的蒸馏水，溶解完全后加水稀释至1L混匀，转入带橡皮塞的试剂瓶中待标定。

　　用差减法称取邻苯二甲酸氢钾3份分别置于250mL锥形瓶中，每份0.4 ～ 0.6 g，加蒸馏水40～50mL，待试剂完全溶解后，加入2～3滴酚酞指示剂，用待标定的NaOH溶液滴定至呈微红色并保持30s不褪即为终点。计算NaOH溶液的浓度。要测定的相对平均偏差≤0.2%。

　　2.食用白醋含量的测定

　　准确移取食用白醋25.00mL置于250mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度摇匀。用25mL移液管分别取3份上述溶液置于250mL锥形瓶中，加入2～3滴酚酞指示剂，用NaOH标准溶液滴定至呈微红色并保持30s不褪即为终点。计算每100mL食用白醋中含醋酸的质量。

　　五、数据记录及处理

　　1.0.1mol·L-1 NaOH标准溶液的标定

　　1. 滴定管、移液管的操作要规范

　　2. 所用蒸馏水不能含CO2

 

食用白醋中总酸量和氨基酸含量(氮)的分析

　　食品工业是人类的生命产业，同时食品也是一种对人类健康有着密切关系的特殊有形产品。其具有独特的特殊性和重要性。食品质量**关系到人民群众的身体健康，生命**及社会经济。食品中的各组分和各组分的含量，是衡量食品质量**的重要指标之一。因此要保证食品**，首要任务就是测定食品中的各组分和各组分的含量。

　　食用白醋是人们家庭常用的调味品之一，其主要成分除醋酸外，也有较高含量的有机酸和氨基酸，因此有一定的营养价值。除此之外，现代医学认为，食用白醋对治病养生，消除疲劳，调节血液酸碱平衡，帮助消化，抗衰老等方面有作用。此外，过多的食用含酸量高的醋对胃病患者有危害作用。由此看来，白醋的质量**与人们的日常生活息息相关。因此，测定食用白醋的成分和各自的含量，对评判白醋质量，保证人们身体健康，有很大的参考价值。

　　就目前来看，测定食用醋的总酸量，我们可以用标准NaOH溶液滴定，因为只要Ka≥10-7的弱酸都可以用NaOH溶液滴定，反应如下：

　　NaOH+ HAc=NaAc+H2O

　　nNaOH+HnA=NanA+nH2O

　　由于是强碱滴定弱酸，滴定突越在碱性范围内，终点的PH值在8.7左右，所以通常选用酚酞作指示剂，从而测得其总酸度。

　　氨基酸态氮亦称氨基氮，氨基酸含有酸性的-COOH基，也含有碱性的-NH2基。它们互相作用使氨基酸成为中性的内盐，常常不能直接用酸碱标准溶液进行滴定。就目前来看，对其氨基酸含量(氮)的分析，则有较多的方法，如甲醛法、凯式定氮法、分光光度法、氨基酸测定仪等。用吸光度法测氨基酸含氮量的原理： 乙酰丙酮与甲醛的混合试剂在N存在的，能发生显色反应，并且与α-氨基酸显色非常灵敏。根据Hantzsch反应原理，认为显色产物为N-取代基2,6-二甲基-3,5-二乙酰基1,4-二氢吡啶羰酸衍生物，反应式如下：

　　相信随着科学技术的发展，将有更多更为方便、快速、准确的测定方法出现。

　　本实验秉着仪器要求低，操作较为简便，实验结果准确度较高的原则，对于食用白醋的总酸量的测定，选用NaOH标准溶液，酚酞做指示剂进行滴定，测定其中醋酸的浓度。对于其中氨基酸总量(氮)的测定，则采用乙酰丙酮—甲醛混合液作为氨基酸的衍生物，再采用分光光度法测定食醋中氨基酸态氮的含量。

　　1 实验部分

　　1.1 实验仪器与试剂

　　滴定管(50ml碱式一只)、分析天平、称量瓶、250ml烧杯、玻璃棒、表面皿、250ml锥形瓶6只、20ml，25ml移液管、试剂瓶(带橡胶塞)、量筒、7200型分光光度计

　　NaOH固体(AR)、邻苯二甲酸氢钾固体(AR)、酚酞指示剂、食用白醋(阆州，四川白醋，产地为四川省，南充市)

　　显色剂：取37.5mL37%甲醛和19.5mL乙酰丙酮混合，加水稀释至250mL

　　氨氮标准液：称量已在105℃下干燥2h的分析纯硫酸铵0.0472g于100mL容量瓶中，混匀，使氨氮浓度为100μg/mL

　　PH=4.7的NaAc-HAc缓冲溶液：称取NaAc20.75g溶于水中，加冰醋酸15mL，稀释至250mL

　　1.2 实验方法

　　1.2.1 食用白醋中总酸量的测定

　　1.2.1.1 0.1mol/LNaOH标准溶液的配制

　　在台秤或分析天平上迅速称取2g NaOH 固体置于烧杯中，立即用500mL水溶解，配制成溶液，贮于具橡皮塞的细口瓶中，充分摇匀，备用。

　　1.2.1.2 NaOH标准溶液的标定

　　在分析天平上准确称取4～6份已在105～110℃烘过1h以上的分析纯的邻苯二甲酸氢钾固体，每份0.4～0.5g，放入250mL锥形瓶中，用20～30mL煮沸后刚冷却的水使之溶解(如果没有完全溶解，可稍微加热)。冷却后加入2滴酚酞试剂，用NaOH标准溶液滴定至呈微红色半分钟内不褪，即为终点，记录所用NaOH标准溶液的体积V。平行滴定4～6次。

　　1.2.1.3 食用白醋的总酸量的测定

　　用移液管移取市售白醋25.00mL，放入250mL容量瓶中，用新鲜刚冷却的去离子水稀释至标线，摇匀。用20mL移液管移取稀释醋样20.00mL，置于250mL锥形瓶中，加水20～30mL，再加入1%酚酞指示剂2～3滴，用0.1mol/LNaOH标准溶液滴定至浅粉色30s不褪色，即为终点。记录所消耗NaOH标准溶液的体积。平行滴定4～6次。

　　1.2.2 食用白醋中氨基酸含量(氮)的测定

　　1.2.2.1 吸收曲线的制作及测定波长的选择

　　用吸量管吸取0.0和0.5mL氨氮标准液分别注入两个25mL容量瓶中，再各加入10.00 PH=4.7的NaAc-HAc缓冲溶液和10.00显色剂，再用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。将它们置于100℃水浴中加热15min后，取出用冷水冷却至室温，移入1cm比色皿中，以试剂空白作为参比，在335—400nm之间，每隔5nm或10nm测一次吸光度，然后以吸光度为纵坐标，波长为横坐标绘制出A-λ吸收曲线，从吸收曲线上确定该测定的适宜波长。

　　1.2.2.2 标准曲线的绘制

　　取7个25mL的容量瓶，编号。用吸量管分别加入0mL，0.1mL，0.2mL，0.3mL，0.4mL，0.5mL，0.6mL 100μg/mL的氨氮标准液，再分别加入10.00 PH=4.7的NaAc-HAc缓冲溶液和10.00显色剂，再用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。将它们都置于100℃水浴中加热15min后，取出用冷水冷却至室温，移入1cm比色皿中，以试剂空白作为参比溶液，在所选择的适宜波长下，测定各溶液的吸光度。再以吸光度为纵坐标，氨态氮浓度为横坐标绘制标准曲线。

　　1.2.2.3 食用白醋中氨基酸含量(氮)的分析

　　用吸量管准确吸取5mL待测液于25mL容量瓶中，再加入10.00 PH=4.7的NaAc-HAc缓冲溶液和10.00显色剂，再用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。将它置于100℃水浴中加热15min后，取出用冷水冷却至室温，移入1cm比色皿中，以试剂空白作为参比溶液，在所选择的适宜波长下，测定其吸光度。由未知液的吸光度在标准曲线上查出5mL未知液中的氮含量。

　　2 实验结果

　　2.1 实验数据记录与处理

　　2.1.1 NaOH标准溶液的标定

　　准确称取2.0047gNaOH固体，溶于500mL蒸馏水，按要求制成标准溶液。

　　2.1.3 吸收曲线的制作及测定波长的选择

　　本实验的测定条件为： 7200型分光光度计，比色皿厚度为1cm，以试剂空白溶液作参比溶液。

　　2.1.4 标准曲线的绘制

　　以下实验的测定条件都为：7200型分光光度计，比色皿厚度为1cm测定波长为345nm，以试剂空白溶液作参比溶液。

　　2.2 结果分析与讨论

　　食用白醋中总酸量和氨基酸含量(氮)的测定有很多方法，本实验采用的NaOH标准溶液滴定法和乙酰丙酮—甲醛分光光度法分别测定白醋的总酸量和氨基酸含量。此法仪器要求低，操作较为简便，实验结果准确度及灵敏度都较高，各次平行实验的相对平均偏差和相对标准偏差都较小，因此实验结果较为可靠。

　　通过实验得此次实验所用的白醋中醋酸浓度为0.1818mol/L，含量较高，从食品检测方面来说，其酸的纯度较高，但不适用于胃病患者食用。

　　此外，在*佳实验条件下以体系的吸光度对氮量浓度绘制了标准工作曲线，绘制出其标准曲线如下图，得其标准曲线方程为：y=0.372x+0.010，R2=0.999，标准曲线如图2所示。标准曲线的线性关系良好，因此此法能较为准确的测出溶液中氨态氮含量。

　　与标准曲线测定条件相同的情况下，样品的吸光度A=0.175;从而可求得5mL白醋中氨态氮含量为2.22μg，含量不是很高，但作为人们家庭常用调味品，仍有一定的营养价值。