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菌落总数样品处理和稀释

菌落总数样品处理和稀释：
　　1．操作方法：以无菌操作取检样25g（或25ml)，放于225mL**生理盐水或其他稀释液的**玻璃瓶内（瓶内预置适当数量的玻璃珠)或**乳钵内，经充分振要或研磨制成1：10的均匀稀释液。
　　固体检样在加入稀释液后，*好置**均质器中以8000~10000r/min的速度处理1min，制成1：10的均匀稀释液。
　　用1ml**吸管吸取1：10稀释液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml**生理盐水或其他稀释液的试管内，振摇试管混合均匀，制成1：100的稀释液。
　　另取1ml**吸管，按上项操作顺序，制10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次即换用1支1ml**吸管。
　　2．无菌操作：操作中必须有“无菌操作”的概念，所用玻璃器皿必须是完全**的，不得残留有**或抑菌物质。所用剪刀、镊子等器具也必须进行**处理。样品如果有包装，应用75%乙醇在包装开口处擦拭后取样。
　　操作应当在超净工作台或经过**处理的无菌室进行。琼脂平板在工作台暴露15分钟，每个平板不得超过15个菌落。
　　3．采样的代表性：如系固体样品，取样时不应集中一点，宜多采几个部位。固体样品必须经过均质或研磨，液体样品须经过振摇，以获得均匀稀释液。
　　4．样品稀释误差：为减少样品稀释误差，在连续递次稀释时，每一稀释液应充分振摇，使其均匀，同时每一稀释度应更换一支吸管。
　　在进行连续稀释时，应将吸管内液体沿管壁流入，勿使吸管**伸入稀释液内，以免吸管外部粘附的检液溶于其内。
　　为减少稀释误差，SN标准采用取10mL稀释液，注入90mL缓冲液中。
　　5．稀释液：样品稀释液主要是**生理盐水，有的采用磷酸盐缓冲液（或0.1％蛋白胨水），后者对食品已受损伤的**细胞有一定的保护作用。如对含盐量较高的食品（如酱油）进行稀释，可以采用**蒸馏

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