细胞名称：C3H 10T1/2 2A6 小鼠胚胎成纤维细胞
来源：起源于 C3H 系小鼠的胚胎组织，属于成纤维细胞类型。该细胞株由原代胚胎成纤维细胞（MEF）经永生化处理获得，保留了胚胎成纤维细胞的典型形态和功能特性，常用于细胞生物学、分子生物学及再生医学等领域的研究。
特性：
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形态学：贴壁生长，呈长梭形或纺锤形，细胞轮廓清晰，核质比适中，具有成纤维细胞典型的 “漩涡状” 或 “放射状” 排列特征。
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增殖能力：在适宜培养条件下可稳定传代，增殖速度较快，但仍保留接触抑制特性，密度过高时会停止分裂。
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核型：接近二倍体核型，遗传背景相对稳定，适合需要保持细胞正常生物学特性的实验（如基因编辑、细胞分化研究等）。
培养条件：
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培养基：常用高糖 DMEM 培养基，添加 10% 胎牛血清（FBS）、1% 双抗（青霉素 / 链霉素）。
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环境：37℃、5% CO₂培养箱，湿度维持在 95% 以上。
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传代：当细胞密度达 80%-90% 时，用胰酶 - EDTA 消化液消化传代，建议传代比例 1:3-1:5，避免过度消化导致细胞损伤。
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冻存：冻存液通常为 90% FBS+10% DMSO，程序降温后保存于 - 196℃液氮中。
应用领域：
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细胞分化研究：作为间充质干细胞的前体细胞，可诱导分化为脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞等，是研究中胚层细胞命运决定的经典模型。例如，通过添加地塞米松、IBMX（3 - 异丁基 - 1 - 甲基黄嘌呤）和胰岛素，可诱导其向脂肪细胞分化，用于肥胖症或代谢疾病机制研究。
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基因编辑工具验证：由于其易于转染（可通过脂质体转染或电穿孔法导入外源基因），常作为 CRISPR-Cas9 等基因编辑技术的靶细胞，用于验证 sgRNA 效率或构建基因敲除 / 过表达细胞系。
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细胞毒性检测：成纤维细胞对药物、纳米材料等外源物质敏感，可用于评估化合物的细胞毒性，为毒理学研究提供基础数据。
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共培养体系构建：与胚胎干细胞（ESCs）或诱导多能干细胞（iPSCs）共培养时，可作为饲养层细胞，提供生长因子（如 LIF）并维持干细胞的未分化状态，常用于干细胞培养体系的优化。
优势：
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来源明确：源于 C3H 小鼠（近交系），遗传背景清晰，实验结果重复性高。
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功能多样：兼具增殖能力和多向分化潜能，适用场景广泛。
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操作友好：培养条件相对简单，对实验室设备要求较低，适合基础研究使用。
局限性：
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永生化特性：虽非完全转化的癌细胞，但永生化过程可能导致部分基因表达异常，与原代 MEF 存在一定差异。
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分化潜能限制：属于成纤维细胞谱系，向非间充质细胞类型（如神经细胞、上皮细胞）的分化能力有限。
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种属差异：作为小鼠来源细胞，与人类细胞的分子机制存在差异，研究结果向临床转化时需谨慎验证。
在一项关于间充质干细胞衰老机制的研究中，研究者利用 C3H 10T1/2 2A6 细胞构建氧化应激模型，通过 H₂O₂处理诱导细胞衰老，发现 SIRT6 基因敲低可显著加速衰老进程，而过表达 SIRT6 则通过增强线粒体功能延缓衰老。该研究借助该细胞株的成纤维细胞特性，揭示了表观遗传调控在细胞衰老中的关键作用，为抗衰老药物研发提供了新靶点。
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污染防控：成纤维细胞对支原体、细菌污染敏感，建议定期进行支原体检测（如 PCR 法），并在培养中添加支原体清除剂（如 M-Plasmocin）。
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批次管理：不同批次冻存的细胞可能存在生长状态差异，建议建立细胞库并记录传代次数（通常建议使用 20 代以内的细胞，避免老化）。
总之，C3H 10T1/2 2A6 细胞凭借其稳定的生物学特性和广泛的适用性，成为生命科学研究中不可或缺的工具细胞，尤其在间充质干细胞生物学和基因功能研究中具有重要价值。
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