NIH/3T3 小鼠胚胎细胞
NIH/3T3 小鼠胚胎细胞作为生命科学领域的经典细胞系,在细胞生物学、肿瘤学、分子生物学等研究中发挥着不可或缺的作用,为探索细胞生理病理机制提供了重要实验基础。
NIH/3T3 细胞源于美国国立卫生研究院(NIH)从 Swiss 小鼠胚胎中分离并连续传代培养获得的成纤维细胞系。该细胞呈贴壁生长,在显微镜下观察,形态多为梭形或不规则多边形,细胞间连接紧密,呈典型的成纤维细胞 “漩涡状” 排列。NIH/3T3 细胞具有接触抑制特性,当细胞生长至相互接触形成致密单层时,会停止增殖,这种特性使其在培养过程中呈现均匀、有序的生长状态,与许多肿瘤细胞的无限制生长形成鲜明对比。此外,该细胞增殖能力稳定,细胞周期相对规律,倍增时间约为 24 - 36 小时,便于科研人员进行标准化实验操作和数据对比。
培养 NIH/3T3 细胞需要严格把控条件。常用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培养基,为细胞提供生长所需的营养物质、生长因子和激素;添加 1% 的青霉素 - 链霉素混合液防止微生物污染。细胞需在 37℃、5% 二氧化碳的恒温培养箱中生长,二氧化碳可调节培养基 pH 值,维持细胞适宜的生存环境。在培养过程中,当细胞融合度达到 80% - 90% 时,使用 0.25% 胰蛋白酶 - 0.53mM EDTA 消化液进行消化传代。传代时需注意控制消化时间,避免过度消化导致细胞损伤;同时,为维持细胞良好的生长状态和生物学特性,需定期复苏冻存的低代数细胞,防止细胞在长期传代过程中出现老化或性状改变。
在科研应用方面,NIH/3T3 细胞具有广泛用途。在细胞转化实验中,它常作为指示细胞,用于检测潜在致癌物质或病毒对细胞的转化能力,通过观察细胞形态、生长特性及接触抑制现象的改变,评估物质的致癌风险。在基因功能研究中,科研人员可将外源基因导入 NIH/3T3 细胞,分析基因过表达或敲低对细胞增殖、迁移、凋亡等生物学行为的影响,探究基因的功能和调控机制。此外,该细胞还可用于药物筛选和毒性测试,评估药物对正常细胞的作用效果和潜在副作用,为新药研发和**性评价提供重要参考。
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