MTT 溶液的配制方法——悬浮细胞 1、收集对数期细胞，调节细胞悬液浓度1×106/ml，按次序将①补足的1640（无血清）培育基40ul ；②加Actinomycin D（有毒性）10ul用培育液稀释 （储存液100mg/ml，需预试寻找佳稀释度，1:10-1:20）；③需检查物10ul；④细胞悬液50ul（即5×104cell/孔），共100ul参入到96孔板（边缘孔用无菌水填充）。每板设对照（加100ml 1640）。 2、置37℃，5%CO2孵育16-48小时，倒置显微镜下观察。 3、每孔参入10 ul MTT试剂溶液（5 mg/ml，即0.5%MTT），继续培育4 h。（悬浮细胞推荐使用WST-1，培育4 h后可跳过步骤4，直接酶联**检查仪OD570nm（630nm校准）测量各孔的吸光值） 4、离心（1000转x10min），小心吸掉上清，每孔参入100 ul二甲基亚砜，置摇床上低速振荡10 min，使结晶物充分溶解。在酶联**检查仪OD570nm（630nm校准）测量各孔的吸光值。
MTT 溶液的配制方法——悬浮细胞
1、收集对数期细胞，调节细胞悬液浓度1×106/ml，按次序将①补足的1640（无血清）培育基40ul ；②加Actinomycin D（有毒性）10ul用培育液稀释 （储存液100mg/ml，需预试寻找佳稀释度，1:10-1:20）；③需检查物10ul；④细胞悬液50ul（即5×104cell/孔），共100ul参入到96孔板（边缘孔用无菌水填充）。每板设对照（加100ml 1640）。
2、置37℃，5%CO2孵育16-48小时，倒置显微镜下观察。
3、每孔参入10 ul MTT试剂溶液（5 mg/ml，即0.5%MTT），继续培育4 h。（悬浮细胞推荐使用WST-1，培育4 h后可跳过步骤4，直接酶联**检查仪OD570nm（630nm校准）测量各孔的吸光值）
4、离心（1000转x10min），小心吸掉上清，每孔参入100 ul二甲基亚砜，置摇床上低速振荡10 min，使结晶物充分溶解。在酶联**检查仪OD570nm（630nm校准）测量各孔的吸光值。