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海德创业(北京)生物科技有限公司
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技术文章

砖石刀使用须知

钻石刀须知

海德创业(北京)生物科技有限公司

www.hedebio.com   邮箱:hedebio@163.com

实验室常用diamond cutter处理不同种类不同硬度的样本,对于昂贵精密的diamond cutter,大家往往会认为它容易损坏,其实这是一种错误的认识。Diatome公司的diamond cutter不仅可以使用很多年,而且也能保证你一直获得满意的样本切片。重要的是,当你**次使用Diatomediamond cutter时,下面的说明或者警告还是有必要仔细阅读。

1.        仔细检查外包装盒没有损坏或打开过

2.        确认diamond cutter在蓝色塑料盒内

3.        小心拿取diamond cutter,注意保护不要损伤刀刃

4.        一旦取出diamond cutter,就要将其放置在一个**的位置

注:每把Diatomediamond cutter在包装前都经过了检查,它的刀刃是**洁净的。因只有经过了我们严格的高标准检查之后,它才能被运输,故**次使用时不需要清洗刀刃。

 

切片前的准备工作

    切片前,样品块需要进行修整以确保**的切片。样品块修整的基本形状见下示意图:

 

 

    切记,样品块的修整对得到高质量的切片非常关键;使用时,diamond cutter的刀锋必须与样品块的上下面平行;样品块不要太厚,如果太厚会增加切片时的压力。

    我们工作中发现,经过树脂包埋的样品用我们提供的修整diamond cutter进行修整可以得到*好的结果。对于冰冻切片、生物样本、工业样本的修整,我们的低温钻石修整刀可以得出*好的结果。如果用剃须刀刀片进行修整,*好用新的无脂刀片进行,在修整*后几刀时,*好换新刀片进行。

警告:

    如果使用比较旧的剃须刀片或者样本块太厚,有一种可能会发生:剃须刀刀刃的钢粒子脱落**在样本上,当你使用diamond cutter切割该样本时,上面的钢粒子非常容易破坏diamond cutter刃。假如初始样本块是使用玻璃刀制作,那么要注意仅使用洁净的新的刀刃,避免玻璃粒子粘在样本上。

 

切片

1.室温切片

下面讲述的都是影响或者决定你的切片质量的关键因素,切片前请仔细阅读。

  • 样本块的放置:必须与diamond cutter的刀刃平行
  • 样本块固定螺栓、刀把等都要拧紧
  • diamond cutter参数:切角和切速要按照说明书的参数设定
  • 水槽液体:液体水平面要与diamond cutter刃水平,水槽内的水要加到与刀刃接触为止。使用牙签将水槽的左右两边弄湿,但要注意不要碰到刀刃和粘接材料。

    为了减少切片困难和延长diamond cutter的使用寿命,应该熟记下面的小窍门:

1.        不要加其它溶剂到水槽的蒸馏水里;它们或许溶解diamond cutter刃与水槽的粘接材料; 溶剂会降低水的表面张力;.溶剂或许破坏你的样本材料

2.        不要切超过*大允许厚度范围的样本

3.        样本块要充分包埋,不要太宽

4.        避免任何硬的物品如铜网、镊子等碰到diamond cutter刀刃

5.        不能在diamond cutter刃上干燥切片。

2. 低温切片

    低温切片容易发生样本粘刀、卷曲、聚团或者漂移等问题,引起这些问题的主要原因就是低温腔静电。温度越低,现象越明显。为了解决这些问题,使低温切片和室温切片一样容易,Diatome公司推荐使用Static-Line" II 静电消除器,在样本修整和切片时都使用静电消除器,这样您就会获得比使用玻璃刀好得多的切片,样本几乎没有压缩变形并且非常均匀。

   目前广泛应用的低温切片是Tokuyasu技术,针对这种切片技术,我们发现如下两条规律很适合diamond cutter:

1.  修整样本或者半薄切片时温度为: - 80°C

2.  超薄切片时温度为: -110°C to -120°C

 

切片后刀的清洁

1.方法一

取走切片,迅速移除不用的切片杂物,然后按照下面的步骤清洁刀刃:

1).清空刀槽然后将其再安装到切片机上.

2).使用无脂剃刀将我们提供的苯乙烯棒切出一个45º斜面

3).用清洁棒沾取100%乙醇,抖落多余的乙醇

4).清洁棒无压力滑过diamond cutter刃,可以重复操作

这种清洁方法是比较成熟和操作简便的,所以使用较为普遍。但要特别注意,操作中清洁棒不要接触到粘结区(刀刃与基座),否则会给diamond cutter带来伤害。

备注:对于聚合不是很好的样本块,切片之后再进行如上所述机械方法清洁**是必要的.

2.方法二

如果你对于方法一的清洁不满意,可以使用方法二看看效果。

切片快速移开后,开始刀的清洁工作:

ⅰ使用毛圈或睫毛移除所有切片后剩余杂物

ⅱ使用蒸馏水彻底冲洗diamond cutter

ⅲ使用干净的压缩空气吹干diamond cutter

3.方法三

如果干燥的切片或残余粘在刀刃上,采取如下步骤

ⅰ将diamond cutter放进蒸馏水中

ⅱ加一到两滴中性洗涤液到蒸馏水中

ⅲ浸泡一晚

ⅳ取出diamond cutter,再用蒸馏水清洗

ⅴ*后再按照方法一的说明进行操作

对于低温diamond cutter,按照如下步骤进行清洗操作:

ⅰ从低温腔室里取出解剖刀

ⅱ用干净的水冲洗,晾干

ⅲ重复方法一各步骤(注意,低温切片diamond cutter建议用50%的乙醇代替100%的乙醇)

 

在使用Diatomediamond cutter过程中常见的问题

1. 无法弄湿diamond cutter刃

解决办法:用无水酒精和Diatome清洁棒处理刀刃;将水槽加满蒸馏水,直到快溢出为止。等待几分钟后,再将多余的蒸馏水去除,用Diatome清洁棒反复滑过diamond cutter刃进行清洁;

假如你怀疑是因为diamond cutter刃的粘接材料被损坏从而影响不能湿润刀刃,那么请立即联系我们,我们会安排取回这把diamond cutter,重新粘接,再归还给您。

2. 样本块表面潮湿

原因:

1.        对于环氧树脂材料,一般由静电造成

2.        对于异丁烯酸盐(脂),这些树脂一般易吸湿受潮(比如LR White等)

解决办法:

对于环氧树脂:

  • 提高室内适度
  • 降低水面位置
  • 用滤纸干燥样本块表面
  • 使用静电消除器

对于异丁烯酸盐(脂):

  • 降低水面呈凹形

3.切片褶皱

由很多原因引起:

  • 外部振动
  • 切片机质量有问题
  • 相关固定螺栓没有拧紧
  • 切割压力太大
  • 切割后角太小(引发切割面和diamond cutter面之间的产生摩擦力

解决办法:

  • 改变切片机位置
  • 检修切片机
  • 紧固相关螺栓
  • 减小样本块宽度
  • 增大切割后角1-2º

4.压力变形

原因:

  • 样本块太软
  • diamond cutter角度太大
  • 刀刃变钝
  • 切割后角太大或者切割速度太快

解决办法:

  • 硬化样本块
  • 将diamond cutter从45º更换小角度的
  • 将刀发回工厂由Diatome公司的专业工程师评估
  • 减小切割后角1-2º和降低切割速度从1mm/秒到0.5mm/秒

5. 刀痕(豁口)

切片出现刀痕时,大多数的diamond cutter都需要重新磨削了。

原因:

  • 你的手指或者其它硬的东西碰到了刀刃
  • 修整样本块时**了其它粒子
  • 样本本身含有的较硬的粒子
  • diamond cutter的多年使用后疲劳所致

解决办法:

  • 避免其它物品碰到刀刃
  • 在制样开始就要尽力保证样本的纯净,从取样到固定、包埋、修整都要小心其它粒子的污染**

6. 条痕

原因:

  • 刀刃不完整
  • 包埋样本时,聚合不好
  • 样本块本身不均一

解决办法:

  • 确认样本已经完全充分聚合
  • 更换样本块
  • 改变切割位置
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