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细胞膜染色有哪些办法——荧光染料

DiD,DiO,DiI,DiR染料是一族亲脂性的荧光染料,可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,这类染料有着很高的淬灭常数和激发态寿命。一旦对细胞染色,这类染料在整个细胞膜上扩散,zui佳浓度时可以使整个细胞膜染色。

DiD,DiO,DiI,DiR .jpg


DiD,DiO,DiI,DiR荧光染料之间的区别

 

DiD染料是一族亲脂性的荧光染料,可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,这类染料有很高的淬灭常数和激发态寿命。一旦对细胞染色,染料在整个细胞膜上扩散,zui佳浓度时可以使整个细胞膜染色。

 

绿色荧光、亲脂性羰花青DiOC18(3)被广泛用作亲脂示踪剂。它在水里是弱荧光的,但当嵌入膜时,它的荧光和光稳定性都很好。

 

DiI是一种亲脂性膜染料,进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐使整个细胞的细胞膜被染色。DiI在进入细胞膜之前荧光非常弱,仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。DiI被广泛用于正向或逆向的,活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂,通常不会影响细胞的生存力。

 

DIR是一个亲脂性、近红外荧光花青染料。这个染料常用于标记细胞质膜。两个18-碳链插入到细胞膜,从而特定的、稳定的细胞染色,几乎不会发生细胞间的染料转移。可以用乙醇配置其储存液。细胞染色通常使用的浓度时1-10uM,孵育10-20分钟的。

 

它们的荧光颜**分明显:DiI(橙色荧光),DiO(绿色荧光),DiD(红色荧光)和 DiR (深红色荧光)这使得他们可以用来对活细胞进行多色成像和流式分析。DiI和DiO可以分别用标准的 FITC和TRITC的滤光片。DiD可以用 633 nm He–Ne 激光器激发,有着比DiI更长的激发波长和发射波长,在细胞和组织染色中更有价值。 DiR的红外荧光可以穿透细胞和组织,在活体成像中用来示踪。

 

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