高特异性！HRM分析预混Mix

高分辨率熔解曲线分析（high resolution melting analysis，HRM）是国际上发展的一种新型的检测单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism，SNP）及扫描突变的新技术。HRM 无需使用序列特异性探针，而是利用一种饱和染料对 PCR 反应产物进行分析。

HRM技术因操作简便快捷、成本低廉、结果准确，并且实现了真正的闭管操作而受到普遍关注。

HRM原理： 

在PCR反应前将新型DNA饱和荧光染料加入反应体系，然后将PCR产物直接导入高分辨熔解分析仪中，在一定的温度范围内将PCR扩增产物进行加热变性，仪器的光学检测系统采集、分析荧光信号并绘制温度熔解曲线，根据不同熔解曲线形状来区分（单个）碱基差异。 

*广泛的 HRM 分析应用领域是基因筛查。基因筛查是搜索 PCR 扩增片段中是否存在未知变异，它可在测序步骤之前进行或者作为替代测序方法。由于 PCR 产物突变可导致 DNA 熔解曲线的形状改变，因此它可以利用 HRM分析检测。杂交双链 DNA 样本扩增并熔解时，其熔解曲线不同于纯合野生型或突变样本。如果操作得当，可以减少至少95%的测序工作量。随着DNA染料和分析仪器的发展，HRM技术还将继续完善和改进，在遗传病分子诊断领域发挥更多的作用。 

HRM应用： 

作为专注于PCR领域超过24年的高品质试剂供应商，Solis BioDyne为您推荐，5X热启动EvaGreen高分辨率熔解曲线分析-预混Mix（PCR）： 

* 不含参比染料ROX，如需要含ROX，请选择：08-33-00001

5X热启动EvaGreen高分辨率熔解曲线分析-预混Mix（PCR）提供如下组分：

极高的性价比（进口品质，国产价格）： 

推荐的qPCR反应体系配置： 

* DNA模板浓度：cDNA 0.1 pg/μl -10 ng/μl ; gDNA 10 pg/μl – 4 ng/μl

推荐的qPCR反应程序： 

发表文章实验结果展示：

【1】Negrisolo, Susanna et al. “Could the interaction between LMX1B and PAX2 influence the severity of renal symptoms?” European Journal of Human Genetics 26 (2018): 1708-1712.

使用Solis试剂盒，分析PAX2基因4号外显子的错义突变

【2】Gaczkowska, Agnieszka, et al. “Association of CDKAL1 Nucleotide Variants with the Risk of Non-Syndromic Cleft Lip with or without Cleft Palate.” Journal of Human Genetics, vol. 63, no. 4, 2018, pp. 397–406.

使用Solis试剂盒，分析CDKAL1基因SNP

HRM分析成功的关键： 

1.保持较短的扩增片段，实现*高的灵敏度。与较大的扩增片段相比，100 bp 左右的扩增片段可简化单核苷酸熔解曲线的检测。

2.确保 PCR 扩增片段的特异性。错配产物和引物二聚体可使数据解释复杂化。引物浓度低于 200nM，MgCl2 在 1.5 mM至3 mM 范围及使用热启动DNA 聚合酶将有助于获得高特异性。

3.确保反应使用足够的模板。一般而言，Ct 应低于30，以生成足够的材料，实现准确的熔解分析。 

除了上述的高效稳健的HRM分析预混Mix产品，Solis BioDyne为客户提供终点PCR（end-point PCR），qPCR（real-time PCR），反转录PCR（Reverse transcription），以及其它PCR所需的配套试剂。产品线纵览图如下：

Solis BioDyne来源于欧盟-爱沙尼亚共和国，专注PCR领域超过24年，Solis BioDyne一直致力于开发和生产高品质的生命科学试剂，现已成为当今欧洲优越的试剂供应商之一。高标准的生产标准和服务使Solis BioDyne成为全球值得信赖的优选PCR供应商。我们的DNA聚合酶，PCR Master Mixes，qPCR Mixes和其它试剂被全球110多个国家的研究者所使用，包括**研究机构和生物技术公司。 

Solis BioDyne拥有一家的蛋白质稳定技术砖利，确保其PCR酶与PCR Mixes产品具有极高的稳定性，研究者可以常温运输以及常温下配置PCR反应体系（无需冰盒）。即使是室温放置30天，其酶活性也没有损耗。 

作为Solis BioDyne在中国的区域总代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供***的Solis BioDyne产品以及订制服务。