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　　Elispot试剂盒是一种用于检测单个细胞分泌的特定分子（如细胞因子、抗体等）的高灵敏度免疫学工具。以下是关于Elispot试剂盒的详细介绍：

　　Elispot试剂盒心组分

　　预包被板：96孔板（通常为PVDF或硝酸纤维素膜），包被特异性捕获抗体。

　　检测抗体：生物素或酶标记的二抗，与靶分子结合。

　　显色底物：如BCIP/NBT（产生蓝色斑点）或AEC（红色斑点）。

　　细胞培养试剂：培养基、刺激剂（如PMA/Ionomycin、抗原肽）。

　　洗涤缓冲液：PBS或Tween-20缓冲液。

　　标准品/对照：阳性对照（已知分泌细胞）和阴性对照。

　　Elispot试剂盒操作流程

　　包被（若未预包被）：加入捕获抗体孵育过夜。

　　封闭：用血清或BSA封闭非特异性结合位点。

　　加样：加入待测细胞（如PBMCs）和刺激剂，37℃ CO₂培养24-48小时。

　　检测：依次加入检测抗体、酶标亲和素、显色底物。

　　读数：使用ELISPOT读板机分析斑点数量/大小。

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