请登录 免费注册
分享
  • 微信
  • 新浪微博
  • 人人网
  • QQ空间
  • 开心网
  • 豆瓣
会员服务
进取版 标准版 尊贵版
| 设为首页 | 收藏 | 导航 | 帮助 |
移动端 |
官方微信扫一扫
微信扫一扫
收获行业前沿信息
产品 资讯
请输入产品名称
噪声分析仪 纺织检测仪器 Toc分析仪 PT-303红外测温仪 转矩测试仪 继电保护试验仪 定氮仪
首页 产品 专题 品牌 资料 展会 成功案例 网上展会
词多 效果好 就选易搜宝!
上海金鹏分析仪器有限公司
新增产品 | 公司简介
注册时间:2007-12-17
联系人:
电话:
Email:
首页 公司简介 产品目录 公司新闻 技术文章 资料下载 成功案例 人才招聘 荣誉证书 联系我们

产品目录

超微量核酸蛋白分析仪
化学发光成像系统
凝胶成像分析系统
蛋白纯化系统
核酸蛋白检测仪
紫外检测仪
自动低压液相色谱分离层析仪
自动部份收集器
恒流泵蠕动泵
紫外分析仪
切胶仪
电泳仪
旋涡混合器
全自动酶标分析仪,洗板机
样品前处理仪器
荧光增白剂检测仪
光化学反应仪
层析柱
首页 >>> 技术文章 >

技术文章

**印迹技术服务western blot

**印迹immunoblotting又称蛋白质印迹western blot,它是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。western blot是在凝胶电泳和固相**测定技术基础上发展起来的一种新的**生化技术。由于**印迹western blot具有SDS-PAGE的高分辨力和固相**测定的高特异性和敏感性,现已成为蛋白分析的一种常规技术。**印迹western blot常用于鉴定某种蛋白,并能对蛋白进行定性和半定量分析。

闪晶生物为您全套**印迹western blot技术服务和相关的试剂耗材。主要实验步骤如下:

  • 蛋白质抽提
    • 实验对象为组织样品,取适量(250~500mg)新鲜组织样品或正确保存的组织样品,加1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂(或核蛋白抽提试剂),匀浆后抽提总蛋白(或核蛋白)。
    • 实验对象为细胞样品,每份样品取1×106~1×107细胞,PBS清洗细胞,去PBS加0.1ml~1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂(或核蛋白抽提试剂)抽提总蛋白(或核蛋白)。

2.蛋白质定量:按BCA蛋白质定量试剂盒操作说明操作,测定样品浓度。
3.变性聚丙烯酰胺不连续凝胶电泳SDS-PAGE:将准备好的样品液和预染蛋白marker分别上样,标准加进个孔中,电泳分离蛋白。
4. 蛋白质转移到PVDF膜,按Bio-Rad蛋白转移装置说明组装滤纸凝胶纤维素夹层,30mA恒流条件下,4°C转移过夜。
5. western blot膜的封闭和抗体孵育

  • 膜在5%脱脂奶粉溶液中室温孵育1小时以封闭膜上的非特异结合。
  • 封闭过的膜加入一抗室温孵育1.5小时,抗原抗体结合。
  • 加入HRP标记的二抗体以结合一抗,室温孵育膜1小时。加入HRP标记的GAPDH抗体可同时检测GAPDH含量。

6. westernblot结果检测:化学发光法检测,膜与化学发光底物孵育,经X胶片曝光显影。图片扫描保存为电脑文件,并用GIS1000分析软件将图片上每个特异条带灰度值的数字化。
7. westernblot数据分析:目的蛋白的灰度值除以内参GAPDF的灰度值以校正误差,所得结果代表某样品的目的蛋白相对含量。
8. 实验报告,包括详细的实验方法及**印迹实验结果的相关数据。
更详细的操作说明

westernblot费用:每张膜上做一种目的蛋白和相应的内参蛋白。每张膜上可以做8个样品。每张膜的费用是:1500.00元。一抗另计,其它试剂免费,一抗订购时间约为3周。乘车路线:火车站坐1号地铁到终点站,然后换5号地铁坐到北桥站即可。
时间:约2-3周。

上海金鹏分析仪器有限公司 
电话  www.17bio.com 通过ISO9001:2000认证
以下产品:
核酸蛋白检测仪、紫外检测仪、紫外分析仪、旋转蒸发器、自动纯水蒸馏器、低温恒温槽
循环水真空泵系列、恒流泵系列、自动部分收集器系列、梯度混合仪系列
层析柱系列、溶剂过滤器系列、动物人工呼吸机系列
电热干燥箱、真空干燥箱、红外干燥箱、烘干器、培养箱、霉菌培养箱、振荡培养箱、生化培养箱、光照培养箱、恒温恒湿箱、隔水培养箱、人工气候箱、厌氧培养箱、二氧化碳培养箱、箱式电炉、管式电炉、电热板封闭电炉、万用电炉、高低温试验箱、盐雾试验箱、老化试验箱、调温调湿箱、植物生长箱、分析天平、精密天平、微量天平、电子天平、天平、架盘天平、静水天平、液体比重天平、电子台秤、水份测定仪、机械天平、扭力天平、酸度计、电导率仪、溶氧仪离子计、滴定仪、卡氏水分测定仪、工业在线分析仪、多参数分析仪、电位仪生物显微镜、学生显微镜、荧光显微镜、金相显微镜、体视显微镜、读数显微镜、倒置显微镜、计量检测显微镜、罗维朋比色计、余氯比色计、色差仪、折光仪、比色计、旋光仪、浊度仪、白度仪、雾度仪、光泽度仪、恒温水箱、恒温水槽、振荡水槽、油浴油槽、电热套、防爆冰箱、低温冰箱、液氮容器、致冷器、精密恒温、槽粉尘计、恒温水浴锅、旋转蒸发器、真空泵、电动搅拌器、恒流泵磁力搅拌器、粉碎机、分散乳化均质机、振荡器梯、度混合器、蠕动泵、超净工作台、除湿机空气自净器、**器、通风柜、可见光分光光度计、紫外可见分光光度计、荧光分光光度计、原子吸收分光光度计、碳硫分析仪、火焰分光度计、气相色谱、液相色谱、质谱仪、色谱相关设备、氢气发生器、氮气发生器、气体发生一体机、空气发生器、层析仪、紫外分析、仪离心机、纯水器、收集器、蒸馏水器、显微(细胞)、、电泳仪、电泳槽、生化分析仪、紫外检测仪、酶标仪、洗板机、PCR仪、基因枪、导入仪、超声波细胞粉碎仪、超声波清洗机

上一篇:恒温振荡培养箱
下一篇:气相色谱法测定聚氯乙烯中的八种增塑剂
              
若网站���容侵犯到您的权益,请通过网站上的联系方式及时联系我们修改或删除