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人脐静脉内皮细胞的冻存事项
人脐静脉内皮细胞
在进行血管内皮细胞实验时,通常选用的细胞模型为人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,简称HUVECs)。而不是直接采用静脉血管内皮细胞或动脉血管内皮细胞。原因是脐静脉内皮细胞具有干细胞的潜能,理论上可以传代50-60次。
调整细胞数2-5×10个/ml,按含细胞的RPMI-1640液ml数,配制等量的冻存液。冻存液中FBS占80%,DMSO占20%。例:含细胞的RPMI-1640液为8ml,应配冻存液8ml,其中FBS为6.4ml,DMSO为1.6ml,混匀。置细胞悬液于冰浴中,逐滴加入冻存液,边加边摇动。加完后用吸管吹打混匀。于冰浴中分装细胞于冻存管中,1.8ml/管,再将冻存管置于冻存盒内置-80℃冰箱,24小时后转入液氮中保存。
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