冷冻保存细胞的方法

冷冻保存细胞的方法：

冷冻保存细胞的方法一:冷冻管置于 4°C 30-0 分钟→(-20°C30 分钟*)→-80°C16~18 小时(或隔夜)→液氮槽 vaporphase 长期储存。

冷冻保存细胞的方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降 1-3°C 至–80°C 以下，再放入液氮槽 vaporphase 长期储存。*-20°C 不可超过 1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80°C 冰箱中，存活率稍微降低一些。

细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？

冷冻管内细胞数目一般为 1x106cells/mlvial，融合瘤细胞则以 5x106cells/mlvial 为宜。

冷冻管应如何解冻？

 取出冷冻管后，须立即放入 37°C 水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在 1 分钟内全部融化，并注意水面不可超过冷冻管盖沿，否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意**，预防冷冻管之爆裂。