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S2果蝇细胞瞬时转染的背景技术
昆虫细胞表达系统已被广泛用于包括组织因子和抗体等在内的众多人类重组蛋白的表达(kosr等,1997)。目前,昆虫表达系统主要用于表达亚单位疫苗,包括兽用疫苗以及部分人类疫苗及重组病毒(maranga等,2002;ryan和walsh等,2012;yang等,2013;miller等,2012)。果蝇s2(drosophilaschneider2)细胞是一种常用于异源基因表达的双翅目果蝇科果蝇属的昆虫细胞,可通过构建稳定细胞池的方法进行重组蛋白表达,近年来已成功用于表达一些具有生物活性的受体蛋白、离子通道蛋白、细胞骨架蛋白、转录因子、激素和凝血因子等(millar等,1995;millar等,1994;tota等,1995;towers和sattelle等,2002;mennella等,2005;winslow等,1989;change等,2005;zmora等,2007;vatandoost等,2012)。
但稳定细胞池的生产过程耗时长达几个月并且产量很低,每升的产量只能达到几毫克。瞬时转染在哺乳动物中用于重组蛋白的快速表达的工艺已非常完善,近年来也逐渐应用到昆虫表达系统中(geisse等,2009;hopkins等,2012;loomis等,2005;shen等,2013)。但由于表达量低和没有找到高效低成本的的转染试剂等原因,果蝇s2细胞的瞬时转染目前只用于构建稳定细胞株之前对表达载体的检验(vatandoost等,2012)。S2果蝇细胞的瞬时转染常用的转染试剂为磷酸钙或脂质体,操作繁琐、价格昂贵,不利于工艺放大,使其应用受到了限制(cherbas等,2007)。目前还没有低成本的阳离子聚合物转染试剂在果蝇s2细胞转染中的应用(hacker等,2013)。
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