人脐静脉血管内皮细胞简单介绍

人脐静脉血管内皮细胞简单介绍
　　人脐静脉血管内皮细胞（英Human Umbilical Vein Endothelial Cells，HUVEC）在进行血管内皮细胞实验时，通常选用的细胞模型为人脐静脉血管内皮细胞（Human umbilical vein endothelial cells，简称HUVECs)。而不是直接采用静脉血管内皮细胞或动脉血管内皮细胞。原因是脐静脉内皮细胞具有干细胞的潜能，理论上可以传代50-60次。

细胞复苏

　　从液氮中取出细胞冻存管，迅速放入37℃水浴中解冻至管内残留一点冰屑。用75%酒精擦拭冻存管后，将内容物吸至一15ml无菌离心管中，逐滴加入预温至37℃的RPMI-1640培液4－5ml混匀，室温1500rpm离心10分钟弃上清。再用RPMI-1640培液4－5ml洗涤一次，离心后弃上清，加HUVEC完全培养液4－5ml备用，每支HUVEC冻存管含细胞量为5×105个。

消化细胞

　　消化液：用pH7.0-7.2的PBS或D-Hank’S液，分别配制0.25%胰酶液和0.02%EDTA-Na2液，用前按1：1混合。在细胞传代或冻存前先消化细胞。具体操作如下：吸净培养液，每瓶加消化液1ml，摇匀使其布满培养瓶细胞面。37℃消化2-5分钟。显微镜下看细胞回缩成圆形后，轻轻震动使绝大部细胞脱落后，每瓶加含10%FBS的RPMI-1640液的中和液4-5ml中和胰酶的消化作用，并用吸管轻轻吹打培养面使细胞完全脱落后，吸至15ml无菌离心管内。4℃1500rpm离心10分钟弃上清，再用中和液洗涤细胞，离心弃上清，加适量RPMI-1640液，混匀后取10ul 细胞悬液加10ul台盼蓝混匀后作细胞计数，按需要做步骤四或五。

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