小鼠睾酮(TESTO)诊断试剂盒(酶联**法)说明书

小鼠睾酮(TESTO)诊断试剂盒(酶联**法)

(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)

原理

试剂盒中将抗睾酮抗体包被于微孔板上，制备成固相抗体，酶结合物含有用辣根过氧化物酶标记的睾酮抗原。反应过程中，若检测标本含有睾酮，则与标记抗原竞争固相抗体，形成固相抗体－抗原或固相抗体－标记抗原复合物，并结合在微孔壁表面，洗去多余的标记抗原，再加入酶底物显色，用2N H2SO4终止酶反应后，在450nm波长下测定吸光度。

试剂盒组成（2-8℃保存）

准备试剂与收集血样

1. 收集标本：血清、血浆（EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20 ℃或-70 ℃）保存，避免反复冻融。血清、血浆、。
2. 实验各组份试剂使用前充分摇匀。
3. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）

检测程序

1. 加样：每孔依次各加入标准品，待测样品50ul。
2. 每孔加入酶标抗体工作液25ul（空白孔除外），置37 ℃暗处反应60分钟。
3. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。
4. 每孔加入底物工作液100ul，置37 ℃暗处反应15分钟。
5. 每孔加入100ul终止液混匀。
6. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值

结果计算与判断

1. 以标准品20、6、2、0.6、0.2、0 ng/ml为横坐标取对数，OD值为纵坐标，使用软件取四参数Logic方程式y = b+(a-b)/(1+xc)^d作图，画出标准曲线。
2. 根据样品OD值计算出相应TESTO含量。软件可以向本公司邮件索取。

检验方法的局限性

溶血、乳糜血样本响测定结果。

试剂盒性能

            1. 灵敏度：*小的TESTO检测浓度小于0.1ng/ ml。

2. 特异性：与其他**没有交叉反应。
3. 重复性：变异系数均小于10％。

注意事项

            1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，每次测定应同时做标准曲线。

2. 洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致**度误差及OD值错误地升高。

            3. 板条开封后剩余板条要再封好，保持板条干燥。

            4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。

5. 本试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断！