海豹油对空间学习记忆的影响
摘要:小鼠侧脑室注射Aβ引起痴呆模型,多次口服海豹油后可改善小鼠对Morris水迷宫立体空间学习记忆功能。
实验材料和方法:
动物:用25—28克,正常昆明种雄性小鼠。
**:β-Amyloid pepfide(25-35),Sigma
海豹油:南海市北洋发展有限公司提供。
**配制:Aβ(25-35)1mg溶于1ml**双蒸水中。
海豹油用蒸溜水配成0.1g/ml和0.2g/ml两种浓度,并用超声波制成乳剂。
实验方法:
Aβ(25-35)在37℃配养箱中老化96小时,使其成为有毒性的凝聚态Aβ,将动物随机分为4 组;假手术组、模型组、低剂量(1g/kg体重)海豹油组、高剂量(2g/kg体重)海豹油组。假手术组小鼠侧脑室注射生理盐水3μl,其它三组小鼠侧脑室注射凝聚态Aβ(25-35)3μl。小鼠侧脑室注射凝聚态Aβ(25-35)后**天开始灌胃給药连续18天,假手术组和模型组每天灌胃等量蒸溜水。小鼠侧脑室注射凝聚态Aβ(25-35)后,第14天开始对小鼠进行Morris水迷宫测试,连续5天,每天训练两个项限。
实验室温度保持在24--25℃,Morris水迷宫中温水加至高过**平台1cm,水温保持在22℃.奶水中不能明显见到**平台.将安装好的摄像装置与计算机、监视器及打印机连接,先打开计算机,再打开其它设备。
1. 在菜单中打开采集,在监视器和显视器中调节摄像头*佳位置.
2. 在菜单��打开文件,选择新建实验后设定一文件名,确定.
3. 在菜单中打开设置,设定开场,输入水迷宫直径(120cm)
4. 在菜单中打开设置,点击测量范围,键盘上调整测量范围的大小(可比液面稍大,但必需将整个液面设置在内).
5. 在菜单中打开设置,点设取装置图像,确定.
6. 将**平台放置其中一个项限(圆行水箱平均分为四个项限)离箱壁15—20cm,在软件的实时录象中设定平台区域.
7. 在菜单中打开记录,点拍摄设置。
8. 在菜单中打开记录,可以开始试验,点击开始拍摄实验。
9. 在菜单中打开记录,将鼠标放在结束实验栏,观察监视器,动物找到**平台马上点击结束实验,若动物在设定时间内仍未找到**平台,则实验自动停止。
10. 在菜单中打开文件,点击此文件名后,在菜单中打开分析,点击数据处理,等待数据处理完毕即可。打开实验结果,打印。
结果:
口服海豹油后对Aβ引起痴呆模型,用Morris水迷宫测试测定动物立体空间学习记忆,寻找**台潜伏时间,训练第1—4天给药组与模型对照组比较各组无明显差异;第五天与模型对照组比较,低剂量(1g/kg体重)海豹油组、高剂量(2g/kg体重)海豹油组均能明显提高空间学习能力。(见下表)
海豹油对小鼠Morris水迷宫第五天寻找**台潜伏期的影响
组别 | 剂量(g/kg) | 动物数 | 潜伏期(秒±SD) | P |
模型对照 | | 16 | 78.5±43 | |
正常对照 | | 12 | 51.8±42 | <0.05 |
海豹油 | 1 | 14 | 56.9±46 | <0.05 |
海豹油 | 2 | 16 | 57.1±41 | <0.05 |
结论:
小鼠侧脑室注射Aβ引起痴呆模型后,连续口服海豹油1g/kg、2g/kg可明显提高小鼠对Morris水迷宫立体空间学习记忆的能力。
讨论:
用计算机管理和摄像监控于Morris水迷宫测定动物立体空间学习记忆能力的方法是国际上先进技术,测定指标客观,实验重复性强,使用方便,可将实验结果重放,用于保健品和**对学习记忆功能测定是一种非常好的方法,也有助于我们的实验结果在国际上的认可。