光学显微镜常用观察方法

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光学显微镜是用光线作光源,放大并观察用肉眼看不见的微小结构的一种光学仪器。*早的显微镜是眼镜商于1604年制造的。

在过去的二十年里,科学家们发现光学显微镜可以用来探测、跟踪和成像物体,它们比传统的可见光波长的一半小,或者几百纳米。

由于光学显微镜在传统上还没有被用于研究纳米级,因此它们通常缺少与标准的校准比较,以检查结果是否正确,以获得在该尺度下准确的信息。显微镜可以**地、一致地指示单个分子或纳米颗粒的相同位置。然而,同时,它可以是高度不准确的,由显微镜所识别的物体在第十亿米以内的位置,实际上可能是百万分之一米,因为不存在错误。

光学显微镜在实验室仪器中是很常见的,可以很容易地放大不同的样品,从精致的生物样品到电气和机械设备。同样,光学显微镜正变得越来越有能力和经济性,因为它们将智能手机中的灯光和摄像机的科学版本结合起来。

光学显微镜常用观察方法

  • 微分干涉(DIC)观察方法
原理
通过特制的棱镜将偏振光分解相互垂直,强度相等的光束,光束在极近的两点(小于显微镜的分辨率)上通过被检物体,从而在相位上略有差别,使图象呈现出立体三维感觉。

特点
可以使被检物体产生三维立体感觉观察效果更直观。无须特殊物镜,与荧光观察配合更好, 可以调节背景和物体的颜色变化而达到理想的效果。

  • 暗视野观察方法

暗视野实际是暗场照明。它的特点和明视野不同,不直接观察到照明的光线,而观察到的是被检物体反射或衍射的光线。因此,视场为黑暗的背景,而被检物体则呈现明亮的像。

暗视野的原理是根据光学上的丁道尔现象,微尘在强光直射通过的情况下,人眼不能观察,这是因为强光绕射造成的。若把光线斜射它,由于光的反射,微粒似乎增大了体积,为人眼可见。暗视野观察所需要的特殊附件是暗视野聚光镜。它的特点是不让光束由下至上的通过被检物体,而是将光线改变途径,使其斜射向被检物体,使照明光线不直接进入物镜,利用被检物体表面反射或衍射光形成的明亮图像。暗视野观察的分辨率远高于明视野观察,达0.02-0.004μm。
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