西安百萤生物科技有限公司
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主营:百萤生物围绕荧光发光、荧光标记、荧光探针等技术进行产品研发,公司产品广泛用于核酸蛋白定量、细胞凋亡研究、细胞信号通路研究、细胞及线粒体膜电位检测、细胞器染色、活体示踪、抗体标记等科研领域。
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细胞膜荧光探针DIR的使用说明

发布时间:2019-12-13
 
细胞膜荧光探针DIR是一种细胞膜电位敏感的亲脂性阴离子荧光染料,DIBAC4(3)本身无荧光,当进人细胞与胞浆内的蛋白质结合后才发出荧光,DIBAC4(3)进入细胞,细胞内荧光强度增加,即膜电位增加表示细胞去极化;反之,细胞内荧光强度降低即膜电位降低表示细胞超极化。DiBAC4(3)是目前*常用的线粒体膜电位检测荧光探针。

1. 染色液制备

(1)配置DMSO或EtOH 储存液:储存液用 DMSO或EtOH配置浓度1~5 mM。

【注】未使用的储存液分装储存在-20℃,避免反复冻融。

(2)工作液制备:细胞膜荧光探针DIR用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS或PBS)稀释储存液,配制浓度为1~5 μM的工作液。

【注】工作液*终浓度建议根据不同细胞系和实验体系来优化。

2. 悬浮细胞染色

(1)加入细胞膜荧光探针DIR适当体积的染色工作液重悬细胞,使其密度为1×106/mL。

(2)37 ℃孵育细胞 2~20min,不同的细胞*佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记结果。

(3)孵育结束,按1000~1500 rpm离心5min。

(4)倾倒上清液,再次缓慢加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。

(5)重复(3),(4)步骤两次以上。


 
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