DisplaceAce™ DNA Polymerase D090710K 10,000 U
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产品名称:DisplaceAce™ DNA Polymerase
货号:D090710K
规格:10,000 U @ 100 U/μl
存储温度:-20℃
DisplaceAce™ DNA Polymerase D090710K 10,000 U 产品描述
应用
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大多数应用中,需要一个链置换活性的DNA聚合酶进行高温条件下DNA的合成
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以RNA为模板合成第1链cDNA
DisplaceAce™ DNA 聚合酶是一种来自嗜热菌的重组DNA聚合酶,通过截短全长酶去除了5'→3'核酸外切酶活性。与芽孢杆菌DNA聚合酶类似,具有很强的链置换活性。以DNA为模板的zui适反应温度为65℃;该酶同样具有以RNA为模板的DNA聚合酶活性。酶可以通过孵育在80℃孵育20分钟进行灭活。如果希望热变性DNA底物(>75°C),那么酶应该在热变性后加入,以保证酶活性。
活力单位定义:一个活力单位指标准条件下,65°C孵育30分钟,将10 nmol的dNTPs转换成不溶于酸的物质所需的酶量。
10X反应缓冲液: 200 mMTris-HCl (pH 8.5) and 50 mM MgCl2.
储存缓冲液: 50 mMTris-HCl (pH 7.5)含50% glycerol, 0.1 M NaCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, and 0.1% Triton® X-100.
质量控制: DisplaceAce DNA Polymerase通过使用不同的DNA模板来检测活性;不含RNase、无外切和内切核酸酶活性。
DisplaceAce™ DNA Polymerase D090710K 10,000 U 其他产品信息
HyperMu™ <R6K gamma ori/KAN-1> Tnp Transposome™ Kit 产品描述
���用领域
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转座子诱变微生物基因的抢救克隆。
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从非大肠杆菌 细jun中拯救质粒。
所述HyperMu™<R6Kγ ORI / KAN-1> TNP转座™是含有R6KγHyperMu转座和一个HyperMu座子之间的稳定的复合物 的大肠杆菌 的复制和卡那霉素可选择的标记物的条件原点。可将转座体电穿孔到活的 大肠杆菌 细胞中,并在细胞内被Mg 2+激活,然后将HyperMu转座子随机插入宿主的基因组DNA中。*在卡那霉素平板上选择转座子插入克隆或通过筛选所需的克隆基因“敲除”或基因功能丧失。
转座子插入位点可以使用提供的与插入的HyperMu转座子末端同源的引物直接测序。或者,可以将插入位点及其侧翼DNA“拯救”为质粒,然后测序。
注意: EPICENTER建议研究人员考虑使用EZ-Tn5™转运体试剂盒来代替HyperMu转运体试剂盒,或者除此以外还使用EZ-Tn5™转运体试剂盒。EZ-Tn5转座体通常 比HyperMu转座体产生10-100倍 的体内插入。
好处
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轻松地从多种细jun属中回收和繁殖质粒,这些质粒在大肠杆菌中无法正常复制 。
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诱变基因的简单抢救克隆过程可加快结构/功能研究和测序。
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转座子DNA的随机插入可确保完整覆盖整个细jun染色体。
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可以使用提供的与转座子末端同源的引物对救援克隆进行双向测序。
图1.克隆救援转座子插入位点在基因组DNA使用HyperMu™<R6Kγ方法ORI / KAN-1> TNP转座™和TransforMax™EC100D™ PIR + 或TransforMax™EC100D™ PIR -116电感受态 大肠杆菌。
*使用Transposome™复合物 在体内 插入转座子,包括但不限于HyperMu™和EZ-Tn5™Transposome™复合物,已获得美国**6,159,736及其相关**和**申请的独jia许可前往EPICENTRE。
对此产品有兴趣,可联系中北林格获取更多详细信息。