（一）基本原理
赖氨酸残基的游离e-氨基可与FITC(其激发波长为492nm,发射光波长为525nm)共价结合。与FITC结合的抗体可用为特异性的探针,以测定细胞相应抗原的存在。FITC具有很高的量子产量(发射光与吸收光的比值,0.85)形成的偶联物的稳定性很好。
（二）仪器和试剂
1.待偶联抗体；
2.碳酸氢钠缓冲液；
3.叠氮钠；
4.庵氰酸荧光素；
5.电磁搅拌器。
以下是Rho相关蛋白激酶1抗体供应商的订购信息:
英文名称 Anti-ROCK1
中文名称 Rho相关蛋白激酶1抗体
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产品名称 |
英文名称 |
规 格 |
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Anti-ROCK1 |
0.1ml/100μg 0.2ml/200μg |
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Rabbit
产品类型 一抗
研究领域 肿瘤 细胞生物 信号转导 细胞周期蛋白 激酶和磷酸酶 细胞骨架
蛋白分子量 predicted molecular weight: 158kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ROCK1
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
产品应用 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
别 名 p160 ROCK1; p160ROCK; Renal carcinoma antigen NY REN 35; Rho associated coiled coil containing protein kinase 1; Rho associated protein kinase 1; Rho-associated coiled-coil containing protein kinase 1; ROCK1_HUMAN.
Rho相关蛋白激酶1抗体供应商抗体的鉴定：
1）抗体的效价鉴定：不管是用于诊断还是用于,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。
EL4细胞，小鼠**瘤细胞 3T3-Swiss albino(胚胎成纤维细胞) 人肺转化细胞;AE1201铬标准溶液（500mg/L,溶剂：水）Chromium
solution质量规格：500mg/L,溶剂：水
CXCL1 Protein
Human 重组人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & NusA 标签)铬标准溶液（100µg/mL,基体：水）Chromium solution质量规格：100µg/mL,基体：水
SCaBER(人膀胱鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2 人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 人细胞裂解液 (阳性对照) 钴标准溶液（500mg/L,溶剂：1%盐酸） Cobalt standard质量规格：500mg/L,溶剂：1%盐酸
人胚肾细胞;293 [HEK-293]钴标准溶液（100(20℃)µg/mL,基体: 1%HNO3） Cobalt standard质量规格：100(20℃)µg/mL,基体: 1%HNO3
大鼠雪旺细胞(RSC)(5×105)镝标准溶液（1000μg/ml）Dysprosium standard质量规格：1000μg/ml
豹猫肺成纤维样细胞;LCL3 中国仓鼠肺细胞，CHL/IU[CHL-11]细胞 C3H 10T1/2 2A6细胞，小鼠成纤维细胞生长抑素质量规格：≥98%,BR,醋酸盐形式Somatostatin
Acetate
人胚胎，皮肤，肌肉;M-7链脲佐菌素(STZ)质量规格：>99%,用于药理造模Streptozocin
HA Others H13N8 甲型流感 H13N8 (A/black-headed gull/Netherlands/1/00) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) 去甲乌药碱盐酸盐质量规格：>98%,BRHigenamine hydrochloride
HSC-T6, 大鼠肝星状细胞系二氢欧山芹素 (标准品)质量规格：HPLC≥98%，标准品Columbianetin
DDR1 Others Rat 大鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人细胞裂解液 (阳性对照) 异泽兰黄素（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Eupatilin
CL-0148MADB106(大鼠癌细胞)5×106cells/瓶×21-十一烷基磺酸钠[离子对色谱级]质量规格：离子对色谱用试剂IPC-ALKS-11
SELL Others
Cynomolgus 食蟹猴 CD62L / L-Selectin / SELL 人细胞裂解液 (阳性对照) 1-十二烷基磺酸钠[离子对色谱级]质量规格：离子对色谱用试剂IPC-ALKS-12
人前列腺上皮细胞裂解物HPEpiCL1-十三烷磺酸钠[离子对色谱级]质量规格：离子对色谱用试剂IPC-ALKS-13
1590细胞，人癌细胞系 小鼠**瘤,EL-4细胞 脑静脉血管平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)十二烷基硫酸钠[离子对色谱级]质量规格：离子对色谱用试剂IPC-SDS
Beta-TC-6(小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞) 5×106cells/瓶×21-PP1萘质量规格：99%，santa进口原装sc-2037651-Naphthyl PP1
3）的亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。