（一）基本原理
赖氨酸残基的游离e-氨基可与FITC(其激发波长为492nm,发射光波长为525nm)共价结合。与FITC结合的抗体可用为特异性的探针,以测定细胞相应抗原的存在。FITC具有很高的量子产量(发射光与吸收光的比值,0.85)形成的偶联物的稳定性很好。
（二）仪器和试剂
1.待偶联抗体；
2.碳酸氢钠缓冲液；
3.叠氮钠；
4.庵氰酸荧光素；
5.电磁搅拌器。
以下是环指蛋白150抗体厂家的订购信息:
英文名称 Anti-RNF150
中文名称 环指蛋白150抗体
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产品名称 |
英文名称 |
规 格 |
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环指蛋白150抗体厂家 |
Anti-RNF150 |
0.2ml/200μg |
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Horse, Rabbit, Sheep
产品类型 一抗
研究领域 细胞生物 学
蛋白分子量 predicted molecular weight: 44kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human RNF150
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:50-200
别 名 KIAA1214; MGC125502; Ring finger protein 150; RNF 150; RN150_HUMAN.
人侵袭性脉络膜色素瘤细胞;MuM-2C核苷酸胶体染料Green-DNA
Dye,SYBR Green I质量规格：BR
NCSTN Others Human 人 NCSTN / Nicasin 人细胞裂解液 (阳性对照) D-葡萄糖无水D-Glucose质量规格：>99.5%,分子生物学级
人胚胎心肌组织来源细胞;CCC-HEH-2咪唑Imidazole质量规格：AR
ACE2 Others Rat 大鼠 ACE2 / ACEH 人细胞裂解液 (阳性对照) L(+)-阿拉伯糖L(+)-Arabinose质量规格：>98%,BR
NCI-H661 人大细胞肺癌细胞去离子甲酰胺Formamide deionized质量规格：>99%,分子生物学级
人胚肾细胞;293 [HEK-293]二1酸组胺；1酸组胺质量规格：>98%,USP,BRHistamine
phosphate
HA Others
Influenza B 乙型流感 (B/Malaysia/2506/2004) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 1酸氯喹,氯喹二1酸盐质量规格：>98%Chloroquine diphosphate
MA, 小鼠星形胶质细胞谷氨酸脱氢酶质量规格：>10 U/mg,BCGlutamate Dehydrogenase
TF Others Sus
scrofa (Pig) 野猪 ansferrin / TF 人细胞裂解液 (阳性对照) 对羟基苯三唑质量规格：>98%,BRHOBT,
1-Hydroxybenzotriazole
大鼠小脑颗粒细胞完全培养基 100mL亚氨基二乙酸(>98%,BR)质量规格：>98%,BRIDA, Iminodiacetic acid
CL-0309TG-905(人脑胶质母细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×2BOC-L-脯氨醇 质量规格：>98%,BRBOC-L-Prolinol
HA Others H7N7 甲型流感 H7N7 (A/Netherlands/219/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 丝氨醇,2-氨基-1,3- 质量规格：>99%,BR2-Amino-1,3-propanediol
人神经元总RNAHN NAN-甲基-D-天门冬氨酸质量规格：>98%,BRN-Methyl-d-Aspartic Acid
SHG44细胞，胶质瘤细胞 人SV-40转化肺成纤维细胞,WI-38AV13细胞 膀胱成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)D-山梨醇质量规格：>98%,BRD-Sorbitol
豹猫皮肤成纤维样细胞;LCS5n-辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷(OGP)质量规格：>98%,用于蛋白分析N-Octyl-β-D-glucopyranoside
2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。
3）环指蛋白150抗体厂家的亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。