（一）基本原理
赖氨酸残基的游离e-氨基可与FITC(其激发波长为492nm,发射光波长为525nm)共价结合。与FITC结合的抗体可用为特异性的探针,以测定细胞相应抗原的存在。FITC具有很高的量子产量(发射光与吸收光的比值,0.85)形成的偶联物的稳定性很好。
（二）仪器和试剂
1.待偶联抗体；
2.碳酸氢钠缓冲液；
3.叠氮钠；
4.庵氰酸荧光素；
5.电磁搅拌器。
以下是环指蛋白12抗体厂家的订购信息:
别 名 RLIM; RING finger LIM domain-binding protein; Ring finger protein 12; RNF12_HUMAN.
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产品名称 |
环指蛋白12抗体厂家 |
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英文名称 |
Anti-RNF12 |
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规 格 |
0.2ml/200μg |
英文名称 Anti-RNF12
中文名称 环指蛋白12抗体
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
产品类型 一抗
研究领域 细胞生物 学 表观遗传学
蛋白分子量 predicted molecular weight: 69kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human RNF12
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200
非洲绿猴肾细胞;VERO红霉素A1醇Erythromycin A Enol Ether质量规格：美国进口
RKO细胞，人结肠癌细胞 人皮肤色素瘤细胞,SK-MEL-1细胞 人B**细胞瘤细胞;RAMOS红霉素乳糖醛酸Erythromycin
lactobionate质量规格：美国进口
HCT-8(人盲肠腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2脱氢尼索地平Dehydro Nisoldipine质量规格：美国进口
ANPEP Others Human 人 ANPEP / CD13 人细胞裂解液 (阳性对照) 4-羟基尼索地平4-Hydroxy
Nisoldipine质量规格：美国进口
人胚胎心脏成纤维样细胞;HEH2外消旋布洛芬酰胺rac-Ibuprofen
Amide质量规格：美国进口
大鼠神经胶质细胞完全培养基 100mL齐多夫定质量规格：>98%,USP34,BR,可用于细胞培养Zidovudine
MKN-45人胃癌细胞 Human gasic cancer cells MKN-45 1640+10% FBS齐多夫定（标准品）质量规格：HPLC>98%,标准品Zidovudine
IFNG Protein Mouse 重组小鼠 IFNG / Ierferon Gamma 蛋白 (His 标签)纳他霉素(标准品)质量规格：含量测定,标准品Natamycin,Pimaricin
NCI-H157(人非小细胞肺腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2
SRSV/3T3(SRSV转化的3T3细胞)硝苯地平质量规格：>99%,CP,ARNifedipine
MesenFectagen? 间充质干细胞转染试剂盒硝苯地平（标准品）质量规格：HPLC>98%,标准品Nifedipine
CL-0350Hela S3(人细胞)5×106cells/瓶×2胆硫酸酯钠盐质量规格：>98%,BRSodium cholesteryl sulfate
EPHB2 Others Human 人 EphB2 / Hek5 人细胞裂解液 (阳性对照) O-叔丁基-L-丝氨酸甲酯盐酸盐质量规格：0.98O-tert-Butyl-L-serine methyl ester hydrochloride
人肺成纤维细胞总RNAHPF NAL-缬氨酸甲酯盐酸盐质量规格：>98%,BRL-Valine methyl ester hydrochloride
Hs-578T细胞，人癌细胞 SD大鼠骨髓间充质干细胞,SDBMSC细胞 Hep-2, 人喉癌细胞系L-抗坏血酸钠质量规格：>98%,BRSodium L-ascorbate
NCI-H661(人大细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2焦1酸钠(AR)质量规格：>99%,ARSodium
pyrophosphate
2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。
3）环指蛋白12抗体厂家的亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。