细胞因子ELISA试剂盒的试验给出一些小主张
细胞因子ELISA试剂盒液体类标本: 包含血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
血清:
室温血液自然凝结10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。细心搜集上清。保存过程中如有沉积形成,应再次离心。
血浆: 应根据标本的要求挑选EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。细心搜集上清。保存过程中如有沉积形成,应再次离心。
尿液: 用无菌管搜集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。细心搜集上清。保存过程中如有沉积形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
细胞培养上清: 检测分泌性的成份时,用无菌管搜集。
ELISA试剂盒的试验条件如下:
ELISA试剂盒的试验操给出一些小主张:
1、每次试验测定的一起做标准曲线,。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔zui高浓度的OD值),请先用样品稀释液稀释必定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n)。
2、制造试剂时,要用旋涡混合仪混匀。加入孔内的试剂,充沛混匀对测试成果尤为重要,zui好运用微量振荡器(运用zui低频率),如无微量振荡器,可在反响前手艺悄悄晃动酶标板1分钟,例如做圆周动作,使加入孔中的反响液混匀。
3、从2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
4、严格按照说明书的操作进行,试验成果断定必须以酶标仪读数为准。
5、不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前运用。
6、试验用酶标仪应严格按运用说明书标准操作,并在运用前充沛预热。
7、手艺洗板应注意:甩掉酶标板内的液体;在试验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。主动洗板:如果有主动洗板机,应在娴熟运用后再用到正式试验过程中。
8、底物B对光敏感,防止长时间暴露于光下。
9、为防止穿插污染,要防止重复运用手中的吸头和封板膜。
10、所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按生物废弃物处理。停止液为2M硫酸,运用时必须注意**。
11、各过程加样均应运用加样器,并常常校准其准确性,以防止试验误差。一次加样时间zui好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐运用排枪加样。