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针对加入慢病毒后,细胞死亡很厉害,该如何处理?

日期:2024-05-13 15:42
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摘要: 并且作为基因载体在**各类遗传性和后天性的人类**中倍受欢迎:从基础研究发展到临床阶段,高浓度、高感染效率的慢病毒都是感染细胞表达(或沉默)目的基因的理想分子工具。 难感染问题该如何解决?
      慢病毒不但可感染分裂或非分裂细胞,还可将外源基因有效地整合到宿主染色体上,从而实现持久表达,又很少引发机体**反应。被誉为「细胞实验首.xuan、体内实验必备」工具病毒。

     并且作为基因载体在**各类遗传性和后天性的人类**中倍受欢迎:从基础研究发展到临床阶段,高浓度、高感染效率的慢病毒都是感染细胞表达(或沉默)目的基因的理想分子工具。

难感染问题该如何解决?

对于一些较难转染的细胞,如原代细胞、干细胞、不分化的细胞等,可以通过添加病毒感染增强液来显著提高转染效率。

除了难感染外,感染效率低和加入慢病毒后,细胞死亡也是科研的又一拦路虎。

针对加入慢病毒后,细胞死亡很厉害,该如何处理?

这种情况是由于慢病毒对该细胞有一定的毒性作用,需要调整并降低感染的 MOI 值,并且在感染后 4 小时、8 小时、12 小时对细胞进行观察,若发现细胞状态变差时,则需要立刻对细胞进行换液操作,使用新鲜的完全培养液替换病毒感染培养液。

如何提高慢病毒对细胞的感染效率?

慢病毒对细胞的感染效率受多个因素影响,如细胞自身生长的状态,细胞数量,细胞被慢病毒感染的难易程度等。因此保证细胞正常增殖,轮廓清晰,合适的细胞密度,选择*you的感染条件可以更好的保证感染效率。对于悬浮细胞,可采用离心感染方法,减少病毒感染时的体积,从而提高感染效率。如将细胞培养板密封后,用平角转子离心机 1000 g 离心 1 h,再放回培养箱中正常培养。
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