高效液相色谱仪测定烟用添加剂中正二氢愈疮酸的含量
一、原理
采用含0.1%甲酸的甲醇一水混合溶剂萃取烟用添加剂中的正二氢愈疮酸,经高效液相色谱仪分离,以荧光检测器测定,外标法定量。
二、试剂与材料
除特殊要求外,均使用分析纯试剂。
1、水,符合GB/T 6682中上等水的要求。
2、乙腈:色谱纯。
3、 甲醇:色谱纯。
4、甲酸:色谱纯。
5、正二氢愈疮酸:纯度≥97%。
6、抗坏血酸。
7、甲醇一水混合溶剂,体积比9:1。
8、萃取溶剂:称1.0 g抗坏血酸用甲醇一水混合试剂溶解转移至1000 mL容量瓶中,定容至刻度。
9、标准溶液
9.1、上等标准储备液:
称取50 mg(准确至0.1 mg)正二氢愈疮酸,用萃取溶剂溶解转移至100 mL容量瓶中,定容至刻度。上等标准储备液在-20℃下避光保存,有效期1个月。
9.2、二级标准储备液:
移取5mL上等标准储备溶液至50 ml。容量瓶中,用萃取溶剂定容至刻度。二级标准储备液在-20℃条件下避光保存,有效期1个月。
9.3、标准工作溶液:
分别准确移取100uL、300uL、500uL、1 000uL、2000uL、4000uL二级标准储备液至50 mL容量瓶中,用萃取溶剂定容到刻度,得到系列标准工作溶液。即配即用。
三、仪器设备
1、高效液相色谱仪,配置柱温箱、梯度洗脱功能和荧光检测器。
2、分析天平,感量0.1 mg。
3、振荡器,*大转速应不小于200 r/min。
4、离心机,*大转速应不小于8000 r/min。
5、有机相滤膜,0.45um。
四、分析步骤
1、样品处理
称取2 g(准确到0.1 mg)试样于100 mL具塞锥形瓶中。准确加入50 mL萃取溶剂,用150 r/rain振荡萃取10 min,取3 mL萃取液置于10 mL具塞离心试管中,在5000 r/min转速条件下离心10min,取1 mL上清液过有机相滤膜,滤液用高效液相色谱仪分析。
2、高效液相色谱仪条件
c18色谱柱规格:填料粒径3.0um,150 mm(长度)×4.6mm(内径);
流动相A:0.1%的甲酸乙腈溶液(体积分数);
流动相B:0.1%的甲酸水溶液(体积分数);
柱温:40℃;
流速:1.0 mL/min;
进样体积:10 uL;
梯度洗脱程序见表1;
荧光检测器检测波长:激发波长:280 nm,发射波长:306 nm。
3、样品测定
按照色谱条件测定试样,每个样品平行测定两次。
样品中正二氢愈疮酸含量由式(1)计算(计算结果应扣除空白值)
高效液相色谱仪测定烟用添加剂中正二氢愈疮酸的含量
高效液相色谱仪测定烟用添加剂中正二氢愈疮酸的含量
高效液相色谱仪测定烟用添加剂中正二氢愈疮酸的含量
高效液相色谱仪测定烟用添加剂中正二氢愈疮酸的含量