上海邦景实业有限公司
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主营:上海邦景实业有限公司专门提供各种ELISA试剂盒 ,各种标本、种属、具体指标齐全。 种属类有:人、家畜类、水产类、禽类、宠物类、植物类、及花类等等(如人、大鼠、小鼠、豚鼠、猪、狗、猴、羊、牛、鸡、兔) 标本种类较多:血清血浆、全血、细胞上清液、组织匀浆、体液、尿液、肺泡灌洗液、粪便、心房水、胸腹水、脑脊髓、前列腺液、精液、**分泌物等等 本公司提供各种种属各种系列ELISA试剂盒, 主要用于科研方面,不用于临床诊断。可以用于检测各种指标。
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常用培养器皿及清洗**

发布时间:2016-09-22
细胞培养需要大量消耗性物品,如玻璃器皿、金属器皿、塑料、橡胶制品、布类、纸类等,因此掌握清洗、**知识,学会清洗、**方法是从事细胞培养工作必须的。
一、清洗 离体条件下,有害物质直接同细胞接触,细胞对任何有害物质十分敏感,极少残留物都可以对细胞产生毒副作用。因此,新的或重新使用的器皿都必须认真清洗,达到不含任何残留物的要求。
(一)玻璃器皿的清洗 一般经过浸泡、刷洗、浸酸、和清洗四个步骤。
1、浸泡:新的或用过的玻璃器皿要先用清水浸泡,软化和溶解附着物。新玻璃器皿使用前得先用自来水简单刷洗,然后用5%盐酸浸泡过夜;用过的玻璃器皿往往附有大量蛋白质和油脂,干涸后不易刷洗掉,故用后应立即浸入清水中备刷洗。
2、刷洗:将浸泡后的玻璃器皿放到洗涤剂水中,用软毛刷反复刷洗。不要留死角,并防止破坏器皿表面的光洁度。将刷洗干净的玻璃器皿洗净、晾干,备浸酸。
3、浸酸:浸酸是将上述器皿浸泡到清洁液中,又称酸液,通过酸液的强氧化作用**器皿表面的可能残留物质。浸酸不应少于六小时,一般过夜或更长。放取器皿要小心。
4、冲洗:刷洗和浸酸后的器皿都必须用水充分冲洗,浸酸后器皿是否冲洗的干净,直接影响到细胞培养的成败。手工洗涤浸酸后的器皿,每件器皿至少要反复“注水-倒空”15次以上,*后用重蒸水浸洗2-3次,晾干或烘干后包装备用。
(二)橡胶制品清洗
新的橡胶制品洗涤方法:0.5mol/L NaOH煮沸15分钟,流水冲洗,0.5mol/L HCl煮沸15分钟,流水冲洗,自来水煮沸2次,蒸馏水煮沸20分钟,50℃烤干备用。
(三)塑料制品的清洗
塑料制品特点:质软、易出现划痕;耐腐蚀能力强、但不耐热。
清洗程序:使用器皿后立即用清水清洗,浸于自来水过夜,用纱布或棉签和50℃清洗液刷洗,流水冲洗,晾干,浸于清洁液15分钟,流水冲洗(15-20遍),蒸馏水浸洗三次,双蒸水泡24小时,晾干备用。
(四)包装:对细胞培养用品进行**前,要进行严密包装,以便于**和贮存。常用的包装材料:牛皮纸、硫酸纸、棉布、铝饭盒、较大培养皿等,近几年用铝箔包装,非常方便,适用。培养皿、注射器、金属器械等用牛皮纸包装后再装入饭盒内,较大的器皿可以进行局部包扎。
二、**和** 微生物污染是造成细胞培养失败的主要原因
(一)物理**法
1、紫外线**:紫外线是一种低能量的电磁辐射,可杀死多种微生物。革兰阴性菌*为敏感,其次是阳性菌,再次为芽孢,**孢子的抵抗力*强。紫外线的直接作用是通过破坏微生物的核酸及蛋白质等而使其灭活,间接作用是通过紫外线照射产生的臭氧杀死微生物。直接照射培养室**,用法简单,效果好。
紫外灯的**效果同紫外灯的辐射强度和照射剂量呈正相关,辐射强度随灯距离增加而降低,照射剂量和照射时间呈正比。因此紫外灯同被照射物的距离和照射时间要适合。离地面2米的30W灯可照射9平方米房间,每天照射2-3小时,期间可间隔30分钟。灯管离地面2米以外要延长照射时间,2.5米照射效果较差。紫外灯照射工作台的距离不应超过1.5米,照射时间30分钟为宜。
紫外灯不仅对皮肤、眼睛伤害,且对培养细胞与试剂等也产生**影响,因此,不要开着紫外等操作。
2、高温湿热**:压力蒸汽**是*常用的高温湿热**方法。对生物材料有良好的穿透力,能造成蛋白质变性凝固而使微生物死亡。布类、物、璃器皿、属器皿、胶和某些培养液都可以用这方法**。
不同压力蒸汽所达到的温度不同,不同**物品所需的有效**压力和时间不同。从压力蒸汽**器中取出**好的物品(不包括液体),应立即放到60-70℃烤箱内烘干,再贮存备用,否则,潮湿的包装物品表面容易为微生物污染。煮沸**也是常用的湿热**方法,它具有条件简单、使用方便等特点。
3、高温干热**:干热**主要是将电热烤箱内物品加热到160℃以上,并保持90-120分钟,杀死**和芽孢,达到**目的。主要用于**玻璃器皿(如体积较大的烧杯、培养瓶)、金属器皿以及不能与蒸汽接触的物品(如粉剂、油剂)。
干热**后要关掉开关并使物品逐渐冷却后在打开,切忌立即打开,以免温度骤变而使箱内的玻璃器皿破裂。干烤箱内物品间要有空隙,物品不要靠近加热装置。
烧灼也是**方法之一,常利用台面上的酒精灯的火焰对金属器皿及玻璃器皿口缘进行烧灼**。
4、过滤**:是将液体或气体用微孔薄膜过滤,使大于孔径的**等微生物颗粒阻留,从而达到**目的。在体外培养时,过滤**大多用于遇热容易变性而失效的试剂或培养液。目前,大多实验室采用微孔滤膜滤器**。关键步骤是安装滤膜及无菌过滤过程。
(二)化学**:新洁而灭,其0.1%水溶液可对器械、皮肤、操作表面进行擦拭和浸泡**。
(三)*****:***主要用于**培养液,是培养过程中预防微生物污染的重要手段,也是微生物污染不严重时的“急救”方法。不同***杀灭微生物不同,应根据需要选择。
可用于细胞培养的****方法很多,但每种方法都有一定的适应范围。如常用的过滤**系统、紫外照射、电子**灯、乳酸、甲醛熏蒸等手段**实验室空气;多用新洁而灭**实验室地面;常用干热、湿热**剂浸泡、紫外照射等方法**培养用器皿;采用高压蒸汽**或过滤**方法**培养液。
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