HOECHST染色实验步骤
1. 将荧光染料（Hoechst 33342、AO、PI 或 EB）以合适浓度直接添加到细胞培养基中。
2. 将细胞孵育 5 分钟。
3. 在倒置荧光显微镜下直接观察细胞。
如果需要，在对转染细胞进行重要染色后修复细胞，以进一步详细分析形态：
1.用PBS清洗细胞（此步骤可省略），然后用4%（w/v）多聚jia醛或1%（v/v）戊er醛室温固定细胞5分钟。
2. 用 PBS 清洗细胞。
3. 将样品用 PermaFluor 水性封固剂封固，并在配备适当滤光片的荧光显微镜下检查细胞。
洗涤应尽可能轻柔，以尽量减少死细胞的损失。
HOECHST染色实验 激发/发射光谱
当与 dsDNA 结合时，Hoechst 33342 在紫外范围 (350 nm) 内具有zui大激发波长，并且染料可以在zui大发射波长 461 nm 的蓝色通道中被zui佳检测（图 2）。 Hoechst 33342 在激发和发射波长之间具有特征性的宽斯托克斯位移，当需要良好的光谱分离以减少荧光干扰时，例如在免疫荧光显微镜的染色质复染中，这种染料是zui佳选择。
沪公网安备 31011302004470号
