液相色谱仪操作步骤和注意事项

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点击量: 197624 来源: 医鸣医学仪器(上海)有限公司
一、操作步骤:     
1)首先对流动相进行过滤,根据需要选择不同的滤膜,一般为有机系和水系,常用的孔径为0.20um0.45um   
2)对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。   
3)正常情况下,仪器首先用甲醇冲洗10-20分钟,然后再进入测试用流动相(如流动相为缓冲试剂,则要二次重蒸水冲洗10-20分钟,直至色谱柱中有机相冲净为止)    
4)一般情况下,流动相冲洗20-30分钟后,仪器方可稳定,*重要的是仪器基线走后,方可进样测试。   
5)同时进两针标样,将其结果相比较,其结果的比值在0.98-1.02之间后,就可以正式进行样品的测试了。   
6)样品测试结束后,就要进行色谱仪及色谱柱的清洗和维护。如流动相为缓冲试剂,同样也要用重蒸水清洗10-20分钟,方可用有机相进行保护,否则,有损色谱柱。   
7)关机时,先关计算机,再关液相色谱。   
8)填写登记本,由负责人签字。
 二、注意事项:   
1)流动相均需色谱纯度,水用20M的去离子水。脱气后的流动相要小心振动尽量不引起气泡。   
2)柱子是非常脆弱的,**次做的方法,先不要让液体过柱子。   
3)所有过柱子的液体均需严格的过滤。   
4)压力不能太大,*好不要超过150kgf/cm2 .   
5).因为缓冲试剂遇有机溶剂,会结晶,有损色谱柱,所以,每次由有机相变流动相或流动相变有机相均需用蒸馏水清洗。