人醛固酮酶免试剂盒 E0900100513

使用前彻底阅读说明书。醛固酮（ALD）是人体内调节血容量的**，通过调节肾脏对钠的重吸收，维持水平衡。醛固酮是调节细胞外液容量和电解质的**，醛固酮的分泌，是通过肾素一血管紧张素系统实现的。当细胞外液容量下降时，刺激肾小球旁细胞分泌肾素，激活肾素-血管紧张素-醛固酮系统、醛固酮分泌增加，使肾脏重吸收钠增加，进而引起水重吸收增加，细胞外液容量增多；相反细胞外液容量增多时，通过上述相反的机制，使醛固酮

Human-Aldosterone ELISA KiT
人醛固酮
产品编号：E
概述
使用前彻底阅读说明书。醛固酮（ALD）是人体内调节
血容量的**，通过调节肾脏对钠的重吸收，维持水平衡。
醛固酮是调节细胞外液容量和电解质的**，醛固酮的分
泌，是通过肾素一血管紧张素系统实现的。当细胞外液容
量下降时，刺激肾小球旁细胞分泌肾素，激活肾素-血管
紧张素-醛固酮系统、醛固酮分泌增加，使肾脏重吸收钠
增加，进而引起水重吸收增加，细胞外液容量增多；相反
细胞外液容量增多时，通过上述相反的机制，使醛固酮分
泌减少，肾重吸收钠水减少，细胞外液容量下降。血钠降
低，血钾升高同样刺激肾上腺皮质，使醛固酮分泌增加。
所提供的ELISA Kit能测量人ALD含量，只能用于研究用
途，不得用于医学诊断。
工作原理
所提供的ELISA Kit是典型的夹心法酶联**吸附测定
试剂盒（ELISA）。包被抗ALD抗体的微孔与待测样本和
酶联亲和物一起温育反应，使得酶联亲和物通过ALD抗
原结合在微孔上，形成抗体、抗原、抗体复合物。反应后
冲洗掉未结合的部分，再加入酶底物反应，底物在酶的作
用下变为蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。通过
测定吸光度来计算待测样本中的ALD含量。
试剂盒组分
需要而未提供的试剂和器材
1． 37℃恒温箱。
2． 标准规格酶标仪。
3． 自动洗板机。
4． 单通道或多通道可调节移液器以及其吸头。
5． 蒸馏水，容量瓶等
6． 干净的试管
注意事项
1． 开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟；
2． 为避免交叉污染，要避免重复使用手中的吸头和试
管；
3． 本试剂盒中不含有传染性试剂，仅供科研体外诊断
使用；
4． 有效期内使用，不可混用不同批号的试剂及包被微
孔板；
5． 试验过程中必须充分混匀；
6． 冲洗过程中必须冲洗充分、扣干，否则将影响结果
**度；
7． 包被微孔板必须干燥保存，避免受潮；
8． 试验完毕后，将剩余试剂放置2-8℃保存；
材料96 test / 48 test
已稀释完的标准品1ml×6瓶
预包被抗体的微孔板96T（一块）/48T（一块）
酶联亲和物6ml×1瓶/ 3ml×1瓶
显色液A 6ml×1瓶/ 3ml×1瓶
显色液B 6ml×1瓶/ 3ml×1瓶
终止液6ml×1瓶/ 3ml×1瓶
ELISA专用洗涤液50ml×1瓶/ 25ml×1瓶
【1:10倍蒸馏水稀释】
9． 试验过程中必须严格按照说明书进行操作，顺序不
得颠倒；
10． 大量样本操作时，应注意加样时间，避免加样缓慢
或间隔时间过长；
11． 储存和使用显**液时应避光；
12． 试验过程中，室温应始终保持在18-28℃；
洗板方法
手工洗板方法：甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几
层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；重复此过程5次。
自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正
式实验过程中。
样品的准备和保存
样品如果不立即分析，应分装后冷冻保存（-20℃），且避
免反复冻融。
血清——用干净试管收集血液后尽快将血清和红细胞通
过离心分离，收集血清。若短时间内分析，可存放在2-8
℃。
细胞培养、组织匀浆、体液——离心去除沉淀，立即分析
或分装后-20℃冷冻保存。
本试剂盒提供的标准品及其他组份为方便用户使用均为
已按照试验标准稀释过的。
正常情况下所绘制的标准
曲线应为自下向上的一条
抛物线。
操作程序
1． 试验前将试剂盒及待测标本放置室温平衡（18-
28℃）并确定本次检测所需的已包被抗体的酶标板
孔数目。
2． 将标准品各100μl依次加入一排孔中，处理后的标
本按100ul每孔加入，并做好标记。
3． 在标准品孔及待测样本孔中分别加入50μl酶联亲
和物，充分混匀。
4． 37℃温育60分钟后充分弃尽各孔内液体，用稀释
好的洗涤液反复冲洗5次并扣干孔内剩余水份。
5． 每孔依照次序，分别加入显色液A、显色液B各
50μl，充分混匀，在室温下避光反应15分钟。
6． 反应过后（正常情况下应为蓝色并带有明显的梯
度）每孔加入终止液50μl，充分混匀（正常情况下
应转变为黄色），终止反应。
7． 用酶标仪在450nm测定O.D.值。
标准品
12 pg
60 pg
120 pg
240 pg
600 pg
1200 pg
结果计算
1. 分别计算各标准品及待测样本的平均吸光度数值
2. 以标准品浓度作为横坐标，吸光度作为纵坐标在普通
坐标纸上绘制标准曲线图
3. 在标准曲线图上根据待测样本的吸光度值查找其对
应的浓度范围
操作程序总结：
准备试剂，样品和标准品
加入准备好的样品、标准品以及酶联亲和物，37℃温育
反应60分钟
洗板5次，加入显色液A/B室温避光反应15分钟
加入终止液，终止反应
30分钟之内读O.D值
计算标本待测因子含量
检测范围：12pg/ml→1200pg/ml
敏感性： ＜7.0pg/ml
特异性： 系统和其它细胞因子无交叉反应。
有效期： 6个月（2→8℃保存）
检测介质：细胞培养上清液
重要说明：
1. 如试验需要做空白对照孔，则需先预留一个孔并做好
标记，但孔内不能加入任何样本。随标准孔和待测样本孔
一起温育。显色过程显色液A、B以及终止液都照常按说
明书要求去做，清洗过程也照旧，但切记要清洗充分。然
后在450nm下读取O.D值即可。
2. 清洗过程一定要充分彻底，否则会影响精度对结果造
成一定程度的影响。