维生素C片鉴别

　　取本品的细粉适量(约相当于维生素C0.2g)，加水10ml，振摇使维生 素C溶解，滤过，滤液照维生素C项下的鉴别试验，显相同的反应。

维生素C片含量测定

　　取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于维生素C 0.2g)，置100ml 量瓶中，加新沸过的冷水100ml 与稀醋酸10ml的混合液适量，振摇使 维生素C溶解，并稀释至刻度，摇匀，经干燥滤纸迅速滤过，弃去初滤液，精密量取续 滤液50ml，加淀粉指示液1ml ，用碘滴定液(0.1mol/L)滴定，至溶液显蓝色并持续30秒 种不退。每1ml 的碘滴定液(0.1mol/L)相当于8.806mg 的C6H8C6。

维生素C片中抗坏血酸的6种测定方法

　　维生素 C，又名抗坏血酸，分子式为 C6H8O6。通常用于防治坏血病及各种慢性传染病的辅助**。市售维生素 C 药片含淀粉等添加剂。由于维生素 C 分子中 的烯二醇基具有较强的还原性，放置在空气中易被氧化，其含量可通过在弱酸性溶液 中用已知浓度的 I2 溶液定量地氧化成二酮基进行测定。通过实验深刻掌握直接碘量法，并巩固滴定的操作，熟悉干过滤法和湿过滤法。

　　下面将六种测定维生素 C 片中抗坏血酸的含量的方法介绍如下：

　　方法一：碘量法

　　维生素 C 为一酸性己糖内酯，有 L，D 型异构体，易溶于水或酒精，又称抗坏血酸 Vc，分子式是 C6H8O6。维生素 C 分子中的烯二醇具有很强的还原性，能被 I2 定量地氧化成二酮基。在空 气中极易被氧化，尤其在碱性介质中更甚，而在酸性条件下较为稳定。因此在测定时加 HAc 溶液 使溶液呈弱碱性，减少维生素 C 的副反应。因而可用直接用 I2 标准溶液测定。

　　取一定量研磨好的维生素 C 片，加入一定量的醋酸和水溶解后，以淀粉溶液为指示剂，用已 知浓度的 I2 溶液滴定该样品中抗坏血酸的含量。该法具有终点变色敏锐、结果准确可靠的优点， 但碘标准溶液的配制与标定比较麻烦。

　　方法二：紫外分光光度法

　　在稀硫酸溶液中, 维生素 C 在 245nm 的波长处有*大吸收,维生素 C 水溶液在 pH5～6 之间稳 定，选择 0.005 mol?L 的硫酸溶液(pH5.2) 作为溶剂，245nm 波长为测定波长。在 0.005 mol?L硫酸溶液中 E1cm 245=560。该法操作简便、快速，测量准确。

　　方法三：荧光法

　　维生素C与邻苯二胺(OPDA)在 pH=4.6 时发生缩合反应,生成强荧光的缩合物,据此建立了一 种灵敏测定抗坏血酸的方法.在激发波长 248nm,发射波长 438nm 处测定其荧光强度,维生素 C 浓度 在 10~70μg/7ml 范围内与其荧光强度呈良好的线性关系,相关系数为 0.999.利用本法进行回收 实验与样品测定都取得了令人满意的结果,适用于大多数果蔬和饮料中 Vc 含量的测定

　　方法四：高效液相色谱法

　　利用各组成成分相对保留时间的不同及锋面积的计算来测定某一主要成份的含量。色谱条 件：色谱柱为 Inertsil ODS–3，4.6×250mm( GL Sciences hc );流动相为己烷磺酸钠溶液(取 0.94g 己烷磺酸钠置 1000mL 量瓶中，加冰醋酸 10mL，加水稀释至刻度，摇匀。 )-甲醇 6∶4 ， pH =3.1;流速为 0.8mL/min;柱温为室温;检测波长为 245nm;进样量为 10μL。测定波长的选择： 取维生素 C 对照品适量， 加甲醇稀释成 0.05mg/mL 的溶液， 200～400nm 波长扫描， 在 结果在 245nm 波长处有*大吸收，故以 245nm 为检测波长。

　　方法五：线性电位滴定法

　　准确称取一定量的纯的抗坏血酸，分别加入一定体积的离子强度调节缓冲液，稀释，使离子 强度分别为 0.2、0.3、0.4，分别用 ****～No.3 标准碱液等量分步滴定，记录消耗碱液的体积 V 与此时溶液的 pH。上机输入 V 与 pH，由程序判断化学计量点所在范围，由化学计量点前的数据 计算 K HA、V-Ve。用 Ve-V 对 V 进行线性回归，回归直线方程 Ve-V=0 处对应的 V 即为 Ve，由 Ve 计算 出抗坏血酸的回收率。**称取研磨好的维生素 C 片，溶解后加入定量离子强度调节缓冲液并加 水稀释， 使离子强度为 0.3， 用标准碱液等量分步滴定， 记录消耗碱液的体积 V 与此时溶液的 pH， 由计算机程序计算 K HA 后求得 Ve， 进而求得每片维生素 C 片抗坏血酸的平均含量， 用此含量除以标示量得相当标示量。

　　方法六：比色法

　　固红 Al 盐与维生素 C 在酸性介质中反应。 在碱性介质中即生成一种蓝色物质。 该物质在 630nm 处有*大吸收。而固红 Al 盐试液与维生素 C 溶液在该范围内均没有吸收峰。该法操作简便、快 速，不需要分离，有专属性，但是，需要有特殊的反应试剂。

　　比较上述六种方案可知，**种方案所用试剂便宜易得，且变色敏锐、结果准确可靠。

维生素C片检验标准操作规程

　　1.目的

　　建立维生素C片检验标准操作规程，规范操作。

　　2.范围

　　适用于维生素C片的检验。

　　3.依据

　　《中国药典》2010版二部

　　4.职责

　　4.1 起草 ：QC 审核： QA 批准人：质量负责人。

　　4.2 QC实施本规程。

　　4.3 QA监督本规程的实施。

　　5.内容

　　本品含维生素C(C6H8NO6)应为标示量的93.0%～107.0%。

　　5.1性状

　　本品为白色或略带淡黄色片。

　　5.2鉴别

　　5.2.1试液及仪器

　　一般实验仪器

　　硝酸银试液：取硝酸银17.5g，加水适量使溶解成1000ml，摇匀。

　　二氯靛酚钠试液：取2，6-二氯靛酚钠0.lg，加水100ml溶解后，滤过，即得。

　　5.2.2 分析步骤

　　5.2.2.1取本品细粉适量(约相当于维生素C 0.2g)，加水10ml，振摇使维生素C溶解，滤过，滤液分成二等份，在一份中加硝酸银试液0.5ml，观察应生成银的黑色沉淀;在另一份中，加二氯靛酚钠试液1～2滴，观察试液的颜色应消失。

　　5.2.2.2取本品的细粉适量(相当于维生素C 10mg)，加水10ml，振摇使维生素C溶解，滤过，取滤液作为供试品溶液;另取维生素C对照品，加水溶解并稀释制成1ml中约含1mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述两种溶液各2µl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-水(5︰4︰1)为展开剂，展开，晾干，立即(1小时内)置紫外光灯(254nm)下检视。供试品溶液所显主斑点的位置和颜色应与对照品溶液的主斑点相同。

　　5.3检查

　　5.3.1溶液的颜色

　　5.3.1.1试液及仪器

　　一般实验仪器

　　5.3.1.2 分析步骤

　　取本品的细粉适量(约相当于维生素C 1.0g)，加水20ml，振摇使维生素C溶解，滤过，滤液使用紫外-可见分光光度计，在440nm的波长处测定吸光度，不得过0.07。

　　5.3.2重量差异

　　5.3.2.1试液及仪器

　　一般实验仪器

　　5.3.2.2 分析步骤

　　取供试品20片，精密称定总重量，求得平均片重后，再分别精密称定每片的重量，每片重量与平均片重相比较(凡无含量测定的片剂，每片重量应与标示片重比较),按表中的规定，超出重量差异限度的不得多于2片，并不得有1片超出限度1倍。

　　5.3.3崩解时限

　　5.3.3.1试液及仪器

　　一般实验仪器

　　5.3.3.2 分析步骤

　　采用升降式崩解仪，升降的金属支架上下移动距离为55mm±2mm，往返频率为每分钟30～32次。将吊篮通过上端的不锈钢轴悬挂于金属支架上，浸入1000ml烧杯中，并调节吊篮位置使其下降时筛网距烧杯底部25mm，烧杯内盛有温度为37℃±1℃的水，调节水位高度使吊篮上升时筛网在水面下15mm处。取供试品6片，分别置上述吊篮的玻璃管中，启动崩解仪进行检查，各片均应在15分钟内全部崩解。如有1片不能完全崩解，应另取6片复试，均应符合规定。

　　5.4含量测定

　　5.4.1试液及仪器

　　一般实验仪器。

　　稀醋酸：取冰醋酸60ml，加水稀释至1000ml，即得。

　　碘滴定液(0.05mol/L)：取碘13.0g，加碘化钾36g与水50ml溶解后，加盐酸3滴与水适量使成1000ml，摇匀，用垂熔玻璃滤器滤过。

　　5.4.2 分析步骤

　　取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于维生素C 0.2g)，置100ml 量瓶中，加新沸过的冷水100ml 与稀醋酸10ml的混合液适量，振摇使维生素C溶解并稀释至刻度，摇匀，迅速滤过，精密量取续滤液50ml，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液(0.05mol/L)滴定，至溶液显蓝色并持续30秒钟不褪。每1ml碘滴定液(0.05mol/L)相当于8.806mg的C6H8O6。供试品重量为M(mg)，消耗碘滴定液(0.05mol/L)的容积为A(ml)，按照下式计算：

　　供试品含量(%)= ………………公式①