电泳仪的原理
物质分子在正常情况下一般不带电,即所带正负电荷量相等,故不显示带电性。但是在一定的物理作用或化学反应条件下,某些物质分子会成为带电的离子(或粒子),不同的物质,由于其带电性质、颗粒形状和大小不同,因而在一定的电场中它们的移动方向和移动速度也不同,因此可使它们分离。
若溶液里一电量为Q的带电粒子 ,在场强为E 的电场中以速度υ 移动,则它所受到的电场力F 应为:
F =QE (6-1)
根据斯托克司定律,在液体中泳动的球状粒子所受到的阻力F’为:
F’=6 ηrυ (6-2)
式中η为介质的粘度系数,r为粒子半径。
当二力平衡,即F =F’时 ,粒子作匀速泳动,且有
υ=QE/6 ηr (6-3)
影响电泳仪的外界因素
1、电场强度
2、溶液的pH值
3、溶液的离子强度
4、电渗作用
5、粒子的迁移率
6、吸附作用
电泳仪故障及处理
一、电泳仪的输出达不到设定值
电泳仪的输出值状态遵“循欧姆定律”:电压U=电流I×(电泳槽)电阻R
电阻R相对不变的情况下,U、I、P(功率P=电流I×电压U)中任意1个参数恒定,其他参数也随之恒定;而任意1个参数变化,其他参数也随之正比变化。
如果电泳仪的输出电压U达不到预置值,应首先观察I或P是否已经恒定,或者已经达到电泳仪所规定的*大I或P(JY电泳仪均有明确指示灯标志)。如果尚未达到极限值,将已经恒定I或P的设置调大(有必要的话至极限值),才能够提高电压输出。
如果电泳仪的电流I达不到预置值,可调整电压U或功率P。
如果电泳仪的功率P达不到预置值,可调整电压U或电流I。
二、电脑控制电泳仪过压报警
(1)检查是否空载使用。(2)是否电泳槽未加缓冲液。(3)是否电泳槽铂金丝断。
三、过流保护
(1)是否存在电泳槽短路现象。(2)缓冲液是否选错。
四、漏电保护
(1)是否有液体溅入仪器内部或输出接口上。(2)是否有很多灰尘落入仪器内部。
五、风机停转或发出异响:更换风机
六、电压、电流不能调节:更换电位器。
七、憋一次保险管:更换保险管。
八、 连续憋保险管:打开机箱
(1)检查二极管D11—D14、D15—D18、D7、D8
(2)查R45电阻旁边达474电容。
(3)检查散热器上摩丝管, 以上三种检查有坏的必须更换。
九、没输出:
(1)检查保险管是否损坏。
(2)打开机箱检查前面板输出座与主板连接的插头是否脱落。
(3)检查瓷罐变压器的插头是否脱落或用万用表检查每组两端应为通路。
电泳仪的选购标准
市面上销售的电泳仪电源,按电压分为高压1500~5000V、中压500~1500V、低压500V以下三种;按电流分为大电流500mA~2000mA、中电流100~500mA、小电流100mA以下三种;按功率分为大功率200~400W、**率60~200W、小功率60W以下三种。
从电压的角度来看,用于核酸(琼脂糖)水平电泳、PCR电泳、DNA回收、印迹转移等实验只需*高电压300V;用于蛋白垂直电泳、种子纯度电泳、醋酸纤维膜电泳等需要使用*高电压600V左右的电泳仪;用于DNA测序(SSR分子标记)、等点聚焦电泳、双向电泳等要求*高电压3000V;用于DNA测序电泳(AFLP分子标记)要求*高电压3800V。
输出的所有参数根据其型号的不同都有一个特定的工作范围,如果实际需要超过这一范围,就应当选择能够满足使用的另外型号的电泳仪电源。因为高、低压电泳仪内部结构特征不同,由于高压电泳仪常附加着多功能,而且高压电泳仪决不能空载运行(容易造**身伤害内部器件损坏),导致操作上难易程度的不同等。因此,选用合适规格的电泳仪很重要。
用户如果需要一台电泳仪电源带几个电泳槽工作时,首先要确定总电流不要超过仪器的*大范围,其次各电泳仪之间是并联的,因而每个电泳仪的电压都是相同的,总电流为各电泳仪电流之和。使用时注意不能超出电泳仪电源额定的范围。