细胞破碎仪知识大全

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超声波细胞破碎仪三大组成部件

  超声波细胞破碎仪就是将电能通过换能器转换为声能,这种能量通过液体介质而变成一个个密集的小气泡,这些小气泡迅速炸裂,产生的象小炸弹一样的能量,从而起到破碎细胞等物质的作用。

  三大组成部件:

  1、超声波发生器

  由信号发生器来产生一个特定频率的信号,这个特定频率就是换能器的频率,一般应用在超声波设备中的超声波频率为20KHz、25KHz、28KHz、33KHz、40KHz、60KHz。

  2、换能器组件

  换能器组件主要由换能器和变幅杆组成。

  3、隔音箱

  可以有效地的降低工作过程中的所发出的噪音,保持实验室安静。

  

超声波细胞破碎仪结构特点

  1、超声波细胞破碎仪可储存5个控制模式。

  2、定时数字显示,输出能量由光条显示,0~100%连续可调,操作直观方便。

  3、超声波细胞破碎仪工作方式有间断(占空比由1%~100%可调)和连续两种选择,间断工作时,脉冲宽度和间断时间可分别设定。

  4、超声波细胞破碎仪工作时间可由数字定时器控制,达到预定时间自动转变为待机状态,定时范围1min~99min。

  5、手持式超声波细胞破碎仪可人为自由控制工作和截止时间,使用灵活方便,适用于少量样品的处理工作。

  

超声波细胞破碎仪的原理

  超声波细胞破碎仪工作原理基于超声波在液体中的空化作用,换能器将电能量通过变幅杆在工具头顶部液体中产生高强度剪切力,形成高频的交变水压强,使空腔膨胀、爆炸将细胞击碎。另一方面由于超声波在液体中传播时产生剧烈地扰动作用,使颗粒产生很大的加速度,从而互相碰撞或与器壁互相碰撞而击碎。

  上述作用亦足以使两种(或两钟以上)不相溶液体混合均匀。由于该装置能达到一般的机械搅拌或捣碎所达不到的效果,故在破碎动植物组织、病毒、**和其它细胞结构以及在乳化、分离、均质等化学反应过程中,被广泛应用在生物化学、医学制药、食品检测、环保监测等领域。

  

超声波细胞破碎仪的用途

  细胞破碎仪通过水介质的空化作用,使细胞等结构并不是十分紧密的物料发生破碎、分离。效果好,效率高。

  超声波细胞破碎仪是一种利用超声波在液体中产生空化效应的多功能、多用途仪器。它能用于多种动植物病毒、细胞**及组织的破碎,超声波细胞破碎仪同时可用来乳化分立、匀化提取、消泡清晰、纳米材料的制备、分散及加速化学反应等。先欧超声波细胞破碎仪被广泛应用于生物学、微生物学、物理学、动物学、农学、制药化工、污水处理、纳米材料等领域。

  

超声波细胞破碎仪的注意事项

  1、探头末端离液面10—15mm,

  2、盛样品的容器为玻璃容器,不可为其它容器;

  3、超声波细胞破碎仪探头不能碰到容器壁和底;

  4、样品须为水相而非有机相;

  5、使用超声波细胞破碎仪微探头时,振幅调节不得超过70%,否则会造成探头损坏。

  

使用超声波细胞破碎仪注意事项

  1 、切记空载(一定要将超声变幅杆插入液体样品后才能开机,)

  2、变幅杆(超声探头)入液体深度: 1.5Cm 左右,液面高度*好有30mm以上,探头要居中,不要贴壁。超声波是垂直纵波,插入太深不容易形成对流,影响破碎效率。

  3、超声参数设置:设置键好仪器工作参数(具体设置见说明书),对于对温度要求比较敏感的样品(比如**)一般外面采用冰浴,或者外接循环冷却水,当实际温度肯定是低于25度,蛋白核酸肯定不会变性。

  1) 时间:超声时间每次*好不要超过5秒 ,间隙时间应大于或等于超声时间,以便于热量散发。时间设定应以超声时间短,超声次数多原则,可延长超声机子以及探头的寿命。

  2) 超声功率: 不宜太大,以免样品飞溅或起泡沫,如小于10ml样品容量,功率应在200w以内,选用2mm超声探头,另将面板后面的变幅杆选择开关打到相应挡;10-200ml样品容量的功率在200-400w,选用6mm超声探头,另将面板后面的变幅杆打到相应挡;200ml以上的样品容量功率在300-600w之间,选用10mm超声探头,另将面板后面的变幅杆打到相应挡;(2MM的小探头功率严禁超过350W)

  3) 容器选择:有多少的样品就选多大的烧杯,这样也是有利样品在超声中对流,提高破碎效率。例如;20ML的处理量*好用20ML的烧杯。

  如100ml大肠杆菌样品设置参数: 超声5秒 /间隙5秒 次数70次(总时间为10分钟)。功率300W(仅供参考)

  500ML左右的量,功率开到500W-800W左右

  4、若样品放在1.5ml的EP管里请一定要将EP管固定好,以以防冰浴融化后液面下降导致空载

  5、日常保养:用完后用酒精擦洗探头或用清水进行超声

  

超声波细胞破碎仪应用范围

  1.细胞破碎/裂解

  2.抽提蛋白、核酸

  3.修剪DNA/RNA

  4.纳米技术研究

  5.染色质**沉淀技术

  6.样品均质、乳化

  7.其它样品处理

  

细胞破碎仪(组织研磨仪)的使用方法

  [准备]:液氮+保温盒、防冻手套(普通那种工作用白色棉手套即可)、防冻钳子、擦干纸、其它必要物品(比如可能用到转移样品的药匙、转移少量液氮的瓶盖、帮助旋开适配器的辅助旋子)

  [方法]:

  1.将研磨球放入适配器,将适配器上下接口处擦干

  2.放入液氮中1min

  3.放入样品。取出适配器,研磨珠放浅口部,深口部放入待研磨样品,若样品含未冻液体,可用钳子夹瓶盖,舀取少量液氮放入其上

  4.冷冻。擦干接口处,旋紧适配器上下部分,放入液氮中冷冻约1.5min

  5.打开研磨仪电源,设置好频率和时间(针对此大容器适配器,参考设置30Hz,2min)

  6.固定。取出适配器放入仪器中固定(一定要固定旋紧,且放下**锁)

  7.放下防护罩,启动研磨

  8.研磨结束,取下适配器,将研磨后的样品转移到容器里,低温保存

  9.放入下一批样品,擦干接口处,旋紧适配器,冷冻,执行下一步研磨

  适配器规格不同,研磨的量也不同,此文仅针对大规格钢罐研磨适配器而言,其他规格可作参考。

  [注意事项]:

  1. 接口处一定要擦干,如果有水,将可能使研磨后旋开困难

  2. 适配器固定时一定要放在正确位置并旋紧,放下**锁,一面出现**事故;研磨声音异常,应立即停止,检查是否出现松动

  3. 放入样品宜少不宜多,以免研磨不充分

  4. 适配器旋开困难时,可敲击底部数下,或者耐心等待

  5. 防止**

  6. 用后清洁整理

  

细胞破碎仪如何进行细胞破碎?

  1、高速组织捣碎:将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调速器先拨至*慢处,开动开关后,逐步加速至所需速度。此法适用于动物内脏组织、植物肉质种子等。

  2、玻璃匀浆器匀浆:先将剪碎的组织置于管中,再套入研杆来回研磨,上下移动,即可将细胞研碎,此法细胞破碎程度比高速组织捣碎机为高,适用于量少和动物脏器组织。

  3、超声波处理法:用一定功率的超声波处理细胞悬液,使细胞急剧震荡破裂,此法多适用于微生物材料,用大肠杆菌制备各种酶,常选用50-100毫克菌体/毫升浓度,在1KG至10KG频率下处理10-15分钟,此法的缺点是在处理过程会产生大量的热,应采取相应降温措施。对超声波敏感和核酸应慎用。

  4、反复冻融法:将细胞在-20度以下冰冻,室温融解,反复几次,由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀,使细胞结构破碎。

  5、化学处理法:有些动物细胞,例如肿瘤细胞可采用十二烷基磺酸钠(SDS)、去氧胆酸钠等细胞膜破坏,**细胞壁较厚,可采用溶菌酶处理效果更好。

  无论用哪一种方法破碎组织细胞,都会使细胞内蛋白质或核酸水解酶释放到溶液中,使大分子生物降解,导致天然物质量的减少,加入二异丙基氟磷酸(DFP)可以抑制或减慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入苯甲磺酰氟化物(PMSF)也能**蛋白水解酥活力,但不是全部,还可通过选择pH、温度或离子强度等,使这些条件都要适合于目的物质的提取。