六通阀进样器是高效液相色谱系统中*理想的进样器，它是由圆形密封垫【转子】和固定底座【定子】组成。美国Rheodyne公司的六通阀进样器*为通用，各大HPLC仪器制造商均以此产品作为仪器的进样器。

　　工作原理：

　　1、手柄位进样【Load】位置时，样品经微量进样针从进样孔注射进定量环，定量环充满后，多余样品从放空孔排出;

　　2、将手柄转动至进样【Inject】位置时，阀与液相流路接通，由泵输送的流动相冲洗定量环，推动样品进入液相分析柱进行分析。

　　虽然六通阀进样器具有结构简单、使用方便、寿命长、日常无需维修等特点，但正确的使用和维护将能增加使用寿命，保护周边设备，同时增加分析准确度。如使用得当的话，六通阀进样器一般可连 续进样3万次而无需维修。

　　以下浅谈有关六通阀进样器的使用及保养事宜：

　　1、手柄处于Load和Inject之间时，由于暂时堵住了流路，流路中压力骤增，再转到进样位，过高的压力在柱头上引起损坏，所以应尽快转动阀，不能停留在中途。在HPLC系统中使用的注射器针头有 别于气相色谱，是平头注射器。一方面，针头外侧紧贴进样器密封管内侧，密封性能好，不漏液，不引入空气;另一方面，也防止了针头刺坏密封组件及定子。

　　2、六通阀进样器的进样方式有部分装液法和完全装液法两种。使用部分装液法进样时，进样量*多为定量环体积的75%，如20gL的定量环*多进样15p,L的样品，并且要求每次进样体积准确、相同; 使用完全装液法进样时，进样量*少为定量环体积的3至5倍，即20gL的定量环*少进样60至1001aL的样品，这样才能完全置换样品定量环内残留的溶液，达到所要求的精密度及重现性。推荐采用100ul的 平头进样针配合20ul满环进样。

　　3、可根据进样体积的需要自已制作定量环，一般不要求**计算定量环的体积，譬如，一根名义上10gL的定量环，实际是9gL还是1lgL并不重要，因为被测样品和校正样品的进样体积保持一致，在计 算结果时误差都被抵消了。

　　4、进样样品要求无微粒和能阻死针头及进样阀的物质，样品溶液均要用0.45~tm的滤膜过滤。防止微粒阻塞进样阀和减少对进样阀的磨损。为防止缓冲盐和其它残留物质留在进样系统中，每次结束 后应冲洗进样器，通常用不含盐的稀释剂、水或不含盐的流动相冲洗，在进样阀的Load和Inject位置反复冲洗，再用无纤维纸擦净注射器针头的外侧。

　　HPLC系统的酸清洗和钝化

　　30%磷酸水溶液通过酸反应和强表面活性剂/洗涤剂的共同作用，可以有效地清洁不锈钢及其它润湿的部件。这一方法比更常用的硝酸“钝化”**更有效、且较少损害【特别是对日常使用低紫外波长的应用来说】。这一磷酸清洗步骤不是起钝化作用，但它是系统钝化前清洗的**步。

　　一般来说，对于阳离子的离子色谱分析或配有氧化方式的电化学检测器以外的应用不需要钝化系统。因为有真空脱气机【每个通道体积为8m1】，可不必用磷酸;中洗全部通道。如果你计划四个通道都要用，则可用湿灌注的方式以4mL/min流速对每个通道清洗8～1 O分钟来清洗脱气机。这一步完成后你必须彻底淋洗管路，用水淋洗2～3次以便将磷酸从溶剂过滤头等部件冲洗净。

　　安装好的HPLC系统的酸清洗和钝化

　　HPLC系统内部可能的污染物来自人的触摸，暴露在实验室化学环境，与零部件制造相关的残留物，或来自先前的流动相和样品的残余物。虽然系统自身也会逐步地被流动相清洗，但某些释放出的杂质会吸附在色谱柱上以及检测器润湿的表面上，因而会降低总的性能。

　　磷酸清洗：

　　通常用于从系统中除去有机杂质。可能是由于洗涤作用，它似乎比强有机溶剂更好也更快。这一步清洗必须在硝酸钝化之前完成。

　　硝酸钝化：

　　实际上是作用于不锈钢表面，在表面上生成均匀的氧化层。这层氧化膜保护不锈钢免受腐蚀【卤化物，螯合剂，等等】并且尽量减少浸出的金属离子进入流动相。

　　以下应用需要在使用前做磷酸清洗和硝酸钝化，包括：

　　①所有的氨基酸分析系统;

　　②所有包含电化学检测器的系统;

　　③所有要分析无机阳离子，包括过渡金属的系统;

　　④所有利用柱后添加衍生试剂或络合样品组分的系统。

　　以下应用需要在使用前只做磷酸清洗，包括：

　　①所有常规用途的、可能在低pH环境下在低紫外检测波长下运行的HPLC系统;

　　②所有需要高灵敏度性能的梯度紫外检测系统。

　　系统清洗指南：

　　注意：在实行这个程序时采用适当的**防护措施准备工作：

　　首先，摘下色谱柱，用两通或接头取代色谱柱。在实行这一清洗步骤时，如果有可能选择监测的紫外波长为：254nm。通过软件或移去电缆的方式取消紫外检测器的自动回零功能。

　　具体步骤：

　　1、用甲醇彻底冲洗系统，以等比例方式通过泵的所有管路。

　　2、用水彻底冲洗系统，以等比例方式通过泵的所有管路。

　　3、以等比例方式通过泵的所有管路导入～30%v/v磷酸水溶液。以1mL/min流速洗大约一个小时。在冲洗期间活动所有的阀，包括：参比阀、进样阀及旁路阀等等。

　　4.用水彻底冲洗所有管路和系统。

　　必要时用6N硝酸【HN03】重复以上步骤。否则，跳到第7步。注意：硝酸是一个强紫外吸收溶液。除非**需要，不要做钝化程序。

　　5.以等比例方式通过泵的所有管路导人6N硝酸水溶液【大约是40%】。以1mL/min流速洗大约一个小时。

　　6.用水彻底冲洗系统，仔细检查是否有任何渗漏，在冲洗期间反复活动所有的阀，包括：参比阀、进样阀及旁路阀等等。

　　注意：如果你要用低于270nm的紫外波长作检测，则需要更大量水的清洗过程，不断的换新鲜水并活动各个阀【冲洗进样器，等】以便从系统中除去所有的痕量硝酸根离子。硝酸清洗后经常在几天之内都会观察到在低紫外波长下有负的基线漂移。勤换水和有耐心是尽快消除紫外本底的关键。

　　7.返回到甲醇洗，然后继续用实验所需的溶剂冲洗。

　　8.通过软件或接上电缆的方式重新使紫外检测器的自动回零功能恢复