HCT116(HCT-116)；人结肠癌细胞

HCT116(HCT-116)；人结肠癌细胞详细说明

细胞名称 HCT116(HCT-116)；人结肠癌细胞

生长特性 贴壁生长

形态特性 上皮样

产品规格 1×10^6 cells/瓶

培养条件 McCoy’s 5A+10%FBS+1%P/S

生长条件 气相：5%CO2  95% 空气   温度：37 ℃

冻存条件 90%FBS+10%DMSO

背景资料 HCT 116是1979年Brattain M等从患结肠癌的男性病人中分离建立的3株恶性细胞之一；产生CEA、角蛋白。在半固体琼脂糖培养基中形成克隆。HCT 116在无胸腺的裸鼠有致瘤性，形成上皮样的肿瘤。

HCT116(HCT-116)；人结肠癌细胞常规说明：

冻存液成分：10%DMSO+40%FBS+50%基础培养液

细胞质检情况：不含**、**、支原体等微生物污染

传代建议：1:2~1:3传代，2~3天换液1次

特别提醒：签收细胞后，如细胞状态不佳，或培养中遇到问题，烦请当天尽快联系，以便处理。当天及时反馈细胞情况和细胞照片是售后跟踪处理重要的参考依据，请务必重视。

一、 HCT116(HCT-116)；人结肠癌细胞复苏

1. 把冻存管从液氮中取出来，立即投入37℃水浴锅中，轻微摇动。液体都融化后（大概1-1.5分钟），拿出来喷点酒精放到超净工作台里。

2. 把上述细胞悬液吸到装10ml培养基的15ml的离心管中（用培养基把冻存管洗一遍，把粘在壁上的细胞都洗下来），1000转离心5分钟。

3. 把上清液倒掉，加1ml培养基把细胞悬浮起来。吸到装有10ml培养基的10cm培养皿中前后左右轻轻摇动，使培养皿中的细胞均匀分布。

4. 标好细胞种类和日期、培养人名字等，放到CO2培养箱中培养，细胞贴壁后换培养基。

5. 3天换一次培养基。

二、 HCT116(HCT-116)；人结肠癌细胞传代

1. 培养皿中的细胞覆盖率达到80%-90%时要传代。

2. 把原有培养基吸掉。

3. 加适当的胰蛋白酶（能覆盖细胞就行），消化1-2分钟。

4. 细胞都变圆后加如入等体积的含血清的培养基终止消化。

5. 用移液枪吹打细胞，把细胞都悬浮起来。

6. 把细胞吸到15ml的离心管中，1000转离心5分钟。

7. 倒掉上清液，加1-2ml培养基，把细胞都吹起来。

8. 根据细胞种类把细胞传到几个培养皿中。一般，癌细胞分5个，正常细胞传3个。继续培养。

三、 HCT116(HCT-116)；人结肠癌细胞冻存

把细胞消化下来并离心（同上）。用配好的冻存液把细胞悬浮起来，分装到**的冻存管中，静止几分钟，写明细胞种类，冻存日期。4℃ 30min，-20℃ 30min，-80℃过夜，然后放到液氮灌中保存。

冻存液的配制： 70%的完全培养基+20%FBS+10%DMSO. DMSO要慢慢滴加，边滴边摇。

要注意的就是无菌操作！

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